Wat zijn de normen in de kwantitatieve analyse voor hepatitis C?

Share Tweet Pin it

Het hepatitis C-virus kan zich in bloedcellen vermenigvuldigen en lymfoproliferatieve ziekten veroorzaken. Dankzij meerdere mutaties worden de afweermechanismen van het lichaam verzwakt, verschijnen genotypen en subtypen van het virus. Met de juiste en tijdige identificatie van een specifiek type hangt af van de effectiviteit van antivirale therapie. Het gevaar van infectie is dat de ziekte asymptomatisch is. In totaal kan 15 procent van de 100 misselijkheid en braken, gewichtsverlies en koorts ervaren.

Definitie van het hepatitis C-virus

De standaardnorm voor hepatitis C is de grootte van 40 tot 60 nm, met de meerderheid van de lipiden, leverschade als gevolg van een acuut of chronisch verloop van de ziekte. Hepatitis C, namelijk het RNA-virus van de Togaviridae-familie, is zeer persistent, overgedragen door bloedtransfusie of het gebruik van niet-steriele artikelen, onjuiste hygiëne van badkameraccessoires, Met kwantitatieve analyse kun je bloed onderzoeken en de genetische structuur van het geïnfecteerde virus identificeren.

Om hepatitis C en zijn genotypes te bepalen, wordt een kwantitatieve analyse uitgevoerd. Afhankelijk van de analysator kunnen drie niveaus van incidentie van RNA-virus worden bepaald.

Subtypes kunnen verschillende modificaties produceren, dus de specificiteit en gevoeligheid van de analysator moet honderd procent zijn. Naast het detecteren van een ziekte bij een patiënt, is het noodzakelijk om de mate van de ernst ervan te bepalen. Sommige laboratoria beschikken niet over alle gegevens over de RNA-virusdefinities, er is een mogelijkheid van een vals-positieve reactie.

Het onderzoek naar hepatitis C zal nauwkeuriger zijn wanneer dergelijke indicatoren worden bestudeerd:

Door de aandacht te vestigen op de resultaten van deze indicatoren en de algemene toestand van het lichaam, wordt een resultaat weergegeven met de graad van infectie, de vorm en het aantal hepatitis C-cellen in het bloed. Dit draagt ​​bij aan het genezingsproces en de effectiviteit van antivirale therapie.

Typen analyse voor hepatitis C

Gepolariseerde kettingreactie (PCR) geeft een idee van de hoeveelheid DNA-deeltjes in de analyses van de patiënt en identificeert op de juiste wijze de veroorzaker van de infectie.

Infectieuze agentia kunnen zichzelf manifesteren. Een dergelijke infectieuze leverziekte zoals hepatitis C is tegenwoordig te behandelen als het op tijd wordt gedetecteerd. Als een virus wordt vermoed, is PCR-analyse uitgevoerd.

Hoewel de symptomen van het virus gedurende lange tijd kunnen worden gemaskeerd, kan een persoon misschien niet het begin van het verloop van de ziekte voelen. Maar met een zorgvuldig onderzoek in 60-70% van de gevallen, wordt hepatitis C gedetecteerd, een primaire analyse waarbij het ELISA is, waarna de PCR-diagnose volgt. De analyse wordt uitgevoerd in bepaalde perioden om het stadium van de ziekte te bepalen en om de juiste behandeling voor te schrijven. Doen zonder, zonder al deze procedures toe te passen, kunt u, enten van hepatitis.

Kwalitatieve en kwantitatieve analyse

Er zijn kwalitatieve en kwantitatieve analyses. De essentie van de eerste is dat het de aanwezigheid van een infectie in het bloed bepaalt. En dit betekent dat het virus gezonde levercellen aantast. Wanneer een patiënt antilichamen tegen hepatitis C heeft, wordt onmiddellijk een kwalitatieve test uitgevoerd. De norm die het resultaat moet opleveren, is "niet gedetecteerd in het bloed". Bij het bepalen van de concentratie van het virus, is er behoefte aan kennis van de gevoeligheid van het diagnostische systeem, omdat de analyse kan worden uitgevoerd door mensen die antivirale therapie ondergaan. De gevoeligheid van de analysator mag niet minder zijn dan 50 IE / ml.

Wanneer een virus wordt gedetecteerd, wordt een kwantitatieve analyse gemaakt, met andere woorden, een virale lading die de concentratie van het virus in het bloed en de ernst van de ziekte bepaalt.

Viraal RNA, dat in een bepaalde hoeveelheid bloed zit, wordt gedefinieerd als de norm van 1 ml per kubieke meter. Na het kwantificeren van de virale lading, is het mogelijk om de mate van infectie van de niet-geïnfecteerde omgeving te beoordelen. Zodra de concentratie hepatitis C in het bloed stijgt, moet het milieu geïsoleerd worden.

Het is in de eerste stadia van belang om de mate van hepatitisconcentratie te bepalen om het tempo van revalidatie te bepalen. Als de hepatitis C-snelheid met meer dan 800 duizend IE / ml wordt overschreden, wordt deze als te hoog beschouwd, met een toename tot een miljoen - kritiek. Als het kwantitatieve bereik minder is dan 400 duizend IE / ml, wordt ervan uitgegaan dat de besmetting van anderen met minder waarschijnlijkheid zal plaatsvinden. Dit cijfer maakt duidelijk dat hepatitis C in het lichaam aanwezig is in zeer kleine doses. De analyse was niet in staat om de kwantitatieve waarde van het RNA van de virusdeeltjes te bepalen, dus het wordt meerdere keren opnieuw toegewezen voor de nauwkeurigheid van de diagnose.

Resultaten van kwantitatieve analyse

De taak van het bepalen van de hoeveelheid virale lading in het bloed van de patiënt is het identificeren van de mate van infectie voor anderen.

Resultaten van PCR-analyse:

  1. Een positief antwoord betekent dat er een infectie is in het biologische materiaal. Met analyse kunt u het exacte aantal geïnfecteerde cellen bepalen.
  2. Een negatief antwoord geeft de afwezigheid van een infectie aan, die zorgvuldig in het lichaam werd doorzocht.

De kwantitatieve methode voor hepatitis C is nauwkeurig en informatief, uitgevoerd op apparatuur met een hoge gevoeligheid. Door de resultaten van de analyse te ontcijferen, weet u of er een infectie is en de specificiteit ervan, om het kleinste aantal geïnfecteerde cellen op hooggevoelige analysers te zien.

Valse positieve of tegengestelde resultaten van de analyse geven zelden, vaker komt het voor in onderzoeken naar immunoassays.

Kwantitatieve analyse van PCR voor hepatitis C

Er zijn veel subtypes van HCV, waardoor het niet altijd mogelijk is om effectieve antivirale geneesmiddelen te selecteren en de gewenste resultaten bij de behandeling te bereiken. De verscheidenheid aan pathogenen is te wijten aan hun vermogen om hun structuur te veranderen, dat wil zeggen, muteren. Als gevolg daarvan heeft immuniteit geen tijd om een ​​krachtige reactie tegen een ziekteverwekker te vormen en medicijnen zijn niet effectief.

Vaak wordt hepatitis gediagnosticeerd in het stadium van cirrose, wat de latere detectie van de ziekte predisponeert vanwege een gebrek aan klinische symptomen. Alleen door laboratoriumtests kan HCV worden gedetecteerd in de incubatieperiode.

De kwantitatieve analyse van hepatitis C maakt het niet alleen mogelijk om de aanwezigheid van het pathogeen in het bloed te bepalen, maar ook om de concentratie ervan te berekenen.

Aanbevelingen voor de voorbereiding van de analyse

Specifieke voorbereiding voor laboratoriumdiagnose is niet vereist. Het volstaat om de volgende aanbevelingen te volgen:

  1. de kwantitatieve analyse wordt uitgevoerd op een lege maag, met de laatste maaltijd - 8 uur vóór het bloedmonster;
  2. voor twee dagen moet worden afgezien van alcohol en "zware" gerechten;
  3. De geneesmiddelen die de patiënt neemt, zijn van bijzonder belang. Ze kunnen het resultaat van het onderzoek beïnvloeden, dus de arts moet hiervan op de hoogte zijn.

Ook zijn zware fysieke inspanning en fysiotherapeutische procedures aan de vooravond van bloedafname niet wenselijk. Het ontkennen van de kwantitatieve analyse voor hepatitis C bleek betrouwbaar te zijn, verwaarloos de bovenstaande aanbevelingen niet.

Vaak ontvangt de patiënt het resultaat van de analyse op een dag. De prijs van de test om de concentratie van de pathogeen in het bloed te bepalen, is afhankelijk van het laboratorium en de kwaliteit van de reagentia en kan 4000 roebel bereiken.

Laboratoriumdiagnose hepatitis C

Tot de primaire diagnostische methoden behoren ELISA, of anders een enzymgekoppelde immunosorbensassay. Het is toegewezen om specifieke antilichamen tegen HCV te detecteren. De efficiëntie bereikt 95%. Als het transcript van het onderzoek een positief resultaat oplevert, is het de moeite waard om de aanwezigheid van een agens in het bloed te vermoeden.

Opgemerkt moet worden dat de helft van de proefpersonen getest met een "+" -test in de loop van de verdere diagnose geen viraal agens in het bloed detecteert. ELISA duidt in dit geval op een eerder contact met HCV in het verleden, wat wordt bevestigd door circulerende antilichamen.

Een meer accurate studie is een polymerasekettingreactie, of anders PCR. Het maakt het mogelijk om de concentratie van RNA van de ziekteverwekker in het bloed te bepalen. Nadat de genetische set van het virus in biologisch materiaal is ontdekt, bevestigt de arts hepatitis C.

PCR wordt aan de patiënt toegewezen om de diagnose te verifiëren. Het maakt het mogelijk om RNA te identificeren in een stadium waarin antilichamen nog niet beschikbaar zijn. Er zijn verschillende soorten genetische studies:

  1. een kwantitatieve analyse van PCR voor hepatitis C, die niet alleen de aanwezigheid van het pathogeen in het bloed vaststelt, maar ook informatie verschaft over de concentratie;
  2. kwaliteit - bevestigt infectie;
  3. genotypering - maakt het mogelijk om het genotype van een pathogeen agens te bepalen en er de meest effectieve geneesmiddelen tegen te selecteren.

Polymerase kettingreactie

Zoals eerder vermeld, zijn er verschillende soorten laboratoriumonderzoek:

  • kwalitatieve analyse - geeft de aanwezigheid van een pathogeen agens in het bloed aan. Dit type diagnose heeft een bepaald "responsniveau", dus het is niet altijd betrouwbaar. Om de resultaten correct te ontcijferen en echte indicatoren te verkrijgen, wordt het aanbevolen om een ​​testsysteem te gebruiken met een gevoeligheid van ten minste 50 IE / ml voor het onderzoek. De norm voor analyse is een 'negatief antwoord' of 'het virus wordt niet gedetecteerd'. Dit duidt op een gebrek aan een genetische set pathogenen in het testmateriaal. Als het resultaat positief was, is verder onderzoek van de patiënt vereist;
  • kwantitatieve analyse van PCR voor hepatitis C bepaalt de virale lading, dat wil zeggen, de concentratie van het pathogene agens in het bloed. Het resultaat van de studie toont het aantal RNA-eenheden in een vast volume van het biologische fluïdum;

Virale belasting is de telling van infectieus RNA in één milliliter bloed van de onderzoeker. De meeteenheden zijn ME / ml, maar sommige laboratoria bepalen "kopieën / ml", terwijl ze de blanco van de analysestandaard aangeven voor vergelijking en evaluatie van de resultaten.

  • genotypering. Vanwege het vermogen van de ziekteverwekker om de keuze van effectieve antivirale middelen voor therapie te veranderen, moet dit op het genotype zijn gebaseerd. Het hangt niet alleen af ​​van het resultaat, maar ook van de duur van de behandeling. HCV 1-hepatitis vereist dus een jaar lang medicijnen, maar slechts 60% van de gevallen vertoont een positieve dynamiek. Wat betreft de tweede en derde genotypes, ze zijn minder resistent tegen de werking van antivirale middelen, daarom is de effectiviteit van de therapie groter dan 85%. Bij het verkrijgen van een dergelijk resultaat van het onderzoek - "het virus is niet getypt", is het de moeite waard om de aanwezigheid te veronderstellen van een agent die niet wordt herkend door standaard testsystemen.

Indicaties voor analyse

De interpretatie van de kwantitatieve analyse voor hepatitis C is noodzakelijk voor:

  1. nader onderzoek van de patiënt, wanneer antilichamen tegen HCV werden gedetecteerd met ELISA;
  2. bevestiging van de diagnose;
  3. vaststelling van virale lading in geval van een gemengde infectie, wanneer een persoon is geïnfecteerd met verschillende soorten pathogenen;
  4. bepaling van behandelingsmethoden (selectie van antivirale geneesmiddelen, vervanging of voltooiing van de behandeling);
  5. de dynamiek van ziekteprogressie beoordelen, evenals de effectiviteit van geneesmiddelen;
  6. bepalen van het stadium van de pathologie (acuut, chronisch).

PCR heeft de volgende voordelen:

  1. goede gevoeligheid, waardoor het mogelijk is om zelfs een kleine hoeveelheid van het virus te tellen;
  2. bepaling van het pathogeen zelf (RNA), niet van antigenen;
  3. specificiteit van de techniek - de oprichting van een specifiek type pathogene agent;
  4. de snelheid van het verkrijgen van resultaten, omdat voor de analyse geen teelt van gewassen op een voedingsmedium vereist is. Het antwoord is klaar in 5 uur;
  5. universaliteit - maakt het mogelijk een genetische set van verschillende pathogenen te identificeren, zowel RNA- als DNA-bevattend (hepatitis B);
  6. detectie van latente infectie.

Een laboratoriumtest helpt de diagnose te bevestigen en maakt integraal deel uit van een uitgebreid onderzoek (analyse van klinische symptomen, resultaten van ELISA en biochemie).

Bovendien wordt PCR veel gebruikt in allergologie, genetica, evenals om het feit van vaderschap vast te stellen.

Decodering van kwantitatieve analyse voor hepatitis C-virus

Evaluatie van de resultaten van laboratoriumdiagnostiek wordt uitgevoerd door een arts door de verkregen gegevens te vergelijken met de norm.

Interpretatie van de analyse voor hepatitis C

Leverziekten in de moderne wereld zijn zeer relevant, omdat dit lichaam onderhevig is aan negatieve invloeden van de omgeving, verkeerde levensstijl, enz.

Maar er zijn zoveel ziekten waar iedereen mee besmet kan raken, en om te voorspellen of dit zal gebeuren of niet, is uiterst moeilijk. Dit is bijvoorbeeld virale hepatitis, die voornamelijk door het bloed wordt overgedragen en zich aanvankelijk niet voelbaar maakt. In het bijzonder hebben we het over C-hepatitis.

Het feit dat het virus in eerste instantie geen speciale symptomen geeft, bemoeilijkt de diagnose, maar toch zijn er vrij effectieve en diverse onderzoeken die kunnen helpen het probleem op te sporen.

Het belangrijkste principe van het opsporen van HCV is de interpretatie van tests voor hepatitis C, dat wil zeggen, een vergelijking van bepaalde indicatoren met normen.

Voorwaarden voor het ontvangen van richting

Diagnose van hepatitis C wordt om verschillende redenen uitgevoerd voor mensen, voornamelijk:

  • vermoedelijke hepatitis;
  • de persoon loopt gevaar;
  • Diagnose is verplicht gezien de specifieke kenmerken van het werk;
  • vrouwen tijdens de zwangerschap of bij de planning.

Er zijn verschillende soorten diagnostiek: sommige zijn oppervlaktestudies, andere zijn diep en zeer nauwkeurig, het principe hiervan is de studie van minimale afwijkingen van normale indices of de detectie van specifieke stoffen.

Voor de detectie van het hepatitis C-virus in het menselijk bloed, worden 3 soorten diagnostische methoden gebruikt:

  1. Immunoenzyme-analyse (ELISA). Het wordt uitgevoerd in het laboratorium, het principe is om antilichamen tegen hepatitis te bepalen, in het bijzonder: IgG, IgM. Deze diagnose geeft geen gedetailleerd antwoord: de persoon is ziek of niet, omdat een derde van de dragers geen antistoffen vertoont. Dit gebeurt vanwege het interval tussen het instappen in het lichaam van het virus en het produceren van antilichamen, dus dit is een dubieuze en zeer oppervlakkige analyse.
  2. Recombinante immunoblot-analyse. Het wordt alleen uitgevoerd om een ​​laboratoriumtest te bevestigen, als het resultaat positief is, dan is of was de persoon de drager van de ziekte. Antilichamen tegen het virus worden niet onmiddellijk teruggetrokken, zelfs niet na succesvolle behandeling van hepatitis. Bovendien is een foutief resultaat mogelijk vanwege een aantal externe factoren.
  3. Polymerase (PCR) analyse. Wat is de meest nauwkeurige methode om hepatitis te bepalen? - unieke PCR. Het is de jongste en de hoogst nauwkeurige diagnosemethode. Het is PCR die een gedetailleerd antwoord kan geven over het verloop van de ziekte, het maakt het mogelijk om de concentratie van het virus in het bloed en zijn genotype vast te stellen (er zijn er 6). Het principe is gebaseerd op de detectie van DNP / RNA-virus in het bloedplasma. Deze methode omzeilt al deze kwaliteit diagnose: met de klinische verschijnselen van hepatitis ten minste 20 moet passeren, maximum - 120 dagen, om antilichamen te genereren - 10-12 weken na het binnendringen van het virus. Maar de detectie in het bloed van de ziekteverwekker kan op geen enkele manier vals zijn, de enige beperking: vanaf het moment van infectie moet het 5 dagen duren, omdat in het volume van het virus het virus mogelijk nog niet is.

PCR wordt uitgevoerd voor nauwkeurige diagnose, er zijn drie ondersoorten:

  1. Kwalitatieve analyse. Bepaal met zijn hulp alleen de aanwezigheid van het virus.
  2. Kwantitatieve diagnose. Gebruikt om de exacte inhoud van het virus in het bloedvolume te bepalen; wanneer gebruikt om de effectiviteit te testen.
  3. Genotypische diagnose. Gebruikt om het genotype en vervolgens het fenotype van het virus te bepalen. Het kennen van het genotype van de ziekteverwekker is uiterst belangrijk voor de therapie, omdat afhankelijk van de kenmerken de loop en de concentratie van medicijnen veranderen.

Hulp tests

In de diagnostische methoden spelen aanvullende analyses een belangrijke rol, die soms de kenmerken van de behandeling volledig veranderen en soms zelfs op een andere diagnose kunnen wijzen.

Biochemische analyse

Met het oog op de behandeling correct te schrijven, en niet om het beeld te verergeren, is het noodzakelijk om betrouwbaar te bepalen van de mate van leverschade, dit wordt gedaan met behulp van biochemische bloedonderzoek dat afwijkingen in de samenstelling zal laten zien.

Veranderingen kenmerken de kenmerken van schade aan het leverweefsel, deze zijn: het stadium van de ziekte, de ernst van fibrose en de gestoorde leverfunctie. De biochemische methode zal echte cijfers laten zien van het gehalte aan bilirubine in het bloed, eiwit, ureum, creatinine, suiker, AST en ALT, alkalische fosfatose, ijzer en gamma-glutamyltranspeptidase. Bovendien zullen het lipidenprofiel en de kwaliteit van eiwitmetabolisme worden bepaald.

Fibrosoomdiagnose

Fibrose is een laesie van het leverweefsel, de aard van de cursus hangt af van de mate waarin het wordt toegediend, dus de diagnose van de ernst van weefselschade is erg belangrijk. Te oordelen naar het beeld van de ziekte, kan de arts de noodzaak van de behandeling te richten als de situatie niet kritisch is, kan het zelfs worden uitgesteld, zodat er geen schade aan andere organen medicijnen veroorzaken.

Andere tests

Soms, om een ​​volledig beeld van de ziekte te krijgen, echografie van de buikholte en de schildklier, een gemeenschappelijke bloedtest. Mensen van hoge leeftijd worden gediagnosticeerd met cardiovasculaire en spijsverteringsstelsel, longen.

Als er geen mogelijkheid is om standaard ELISA / PCR-testen uit te voeren, geven ze specifieke door: analyse van speeksel en andere vloeistoffen op de aanwezigheid van pathogenen.

indicatoren

Technologieën voor de diagnose van hepatitis C staan ​​op een hoog niveau en geven vaak geen onjuiste resultaten.

Desondanks is het onmogelijk om 100% nauwkeurigheid te garanderen: fout-positieve resultaten zijn mogelijk.

Geef het verkeerde antwoord een bloedtest kan in het geval van niet-naleving van de regels van analyse of met een aantal andere factoren. De belangrijkste redenen voor de vervorming van de resultaten:

  • sommige specifieke infecties die reageren met screeningstoffen en de test is positief;
  • studeren tijdens zwangerschap;
  • aanwezigheid van bijproducten in het lichaam;
  • schending van het immuunsysteem;
  • overtreding van de regels voor bloedafname.

Interpretatie van tests voor hepatitis C

Interpretatie van tests voor hepatitis wordt uitgevoerd door een ervaren specialist die afwijkingen van de norm van elk van de indicatoren zal bepalen en een conclusie zal schrijven over de waarschijnlijkheid van hepatitis.

Wanneer de diagnose ELISA wordt gesteld, zal de detectie van antilichamen in het bloed accuraat zeggen dat er een hepatitis-virus in het menselijk lichaam is of was: ofwel is de patiënt nu ziek of hebben de antigenen eenvoudigweg geen tijd om uit het lichaam te worden uitgescheiden. Er moet aan worden herinnerd dat antilichamen werken niet meteen - een bepaalde tijd moet verstrijken, zodat een dergelijke analyse betrouwbare resultaten opleverde, dus indien nodig moet je opnieuw bloed doneren om te testen.

Als de diagnose PCR een positieve respons gaf, dan is de pathogeen met een waarschijnlijkheid van 99% in het lichaam. In dit geval is het noodzakelijk om de ernst en gedrag genotype rna voor koerscorrectie te bepalen en dan is het dringend om de behandeling te starten zodat hepatitis niet chronisch wordt. De gegevens van polymeraseanalyses worden als zeer nauwkeurig beschouwd, omdat ze maximaal 1 vertegenwoordiger van het virus in de cel kunnen detecteren. Als de snelheid van de polymerasekettingreactie niet wordt geschonden, is het antwoord negatief en maak je je geen zorgen.

Bij het vaststellen van hepatitis C, kwantitatieve bepaling van bilirubine, ALT en AST, worden eiwitten gebruikt. Hun inhoud geeft ook de ernst en de ernst van de ziekte aan.

De algemene tabel met indicatoren van stoffen in het bloed, die op C-hepatitis na biochemische analyse kunnen wijzen:

Hepatitis C. Kwantitatieve analyse. Norm, interpretatie van de resultaten

Hepatitis C. Wat is gevaarlijk voor de mens. Hoe een infectie te diagnosticeren. Wat je nodig hebt om de analyse te doen

Hepatitis C-virus. Dan is het gevaarlijk. Hoe het op tijd te identificeren.

Hepatitis C-virus of HCV is een infectieziekte die een ribonucleïnezuurmolecuul draagt.

Dit type virus kan zich gemakkelijk aanpassen aan de levensomstandigheden en wordt vaak getransformeerd in verschillende vormen van de ziekte, dus het verdedigingssysteem van ons lichaam is zo moeilijk te hanteren. Zes belangrijke genetische soorten infecties en tientallen subtypes zijn geclassificeerd. In onze regio worden vaak de eerste drie soorten virus aangetroffen.

Volgens de statistieken komt slechts een kwart van de gevallen van HCV-ziekte zonder complicaties voor, in alle andere gevallen de norm, als de infectie zich ontwikkelt tot een chronisch proces dat de inwendige organen nadelig beïnvloedt. Hepatitis kan dus gecompliceerd worden door leverfibrose - het proces van vervanging van levercellen. Verdere complicaties ontwikkelen zich door een kettingreactie: als gevolg van fibrose zijn er kankertumoren, leverziekte ontwikkelt zich tot cirrose.

In de meeste gevallen komt de infectie via bloedvaten in het menselijk lichaam. Stel het hepatitis C-virus op verschillende manieren vast. Controleer de concentratie van antilichamen tegen HCV. Infectie trad niet op als antilichamen tegen haar niet in het bloed van de patiënt werden gevonden. Anders wordt het virus dieper bestudeerd, een andere test wordt uitgevoerd - PCR. Alleen deze methode maakt het mogelijk om het RNA van het virus slechts anderhalve week na infectie te identificeren, op een moment dat het lichaam geen tijd heeft om antilichamen tegen infectie te produceren en de gevolgen van infectie niet worden weerspiegeld in de algemene toestand, vooral in de resultaten van andere onderzoeken zoals LHC en biopsie.

Analyse van PCR op RNA: kwantitatief en kwalitatief. Uitleg van resultaten

Virale belasting of kwantitatieve PCR-analyse - een test voor het bepalen van het infectieniveau in het plasma. In feite is kwantitatieve analyse het aantal moleculen van infectieus ribonucleïnezuur in één milliliter bloed.

P-DNA is een snelle, goedkope en niet de meest nauwkeurige kwantitatieve manier om een ​​virus te detecteren gebaseerd op de detectie van cellen van vertakt DNA. Deze test identificeert mogelijk niet de infectie die in het lichaam aanwezig is als gevolg van een slechte gevoeligheid - ongeveer 450 IE / ml.

De kwantitatieve methode van transcriptionele amplificatie maakt het mogelijk om RNA-cellen in het lichaam te vinden. Deze methode verscheen relatief recent, het is goedkoop en is een voldoende effectief diagnostisch hulpmiddel. De gevoeligheid van de test is ongeveer 10 IE / ml.

Laten we proberen de resultaten van de tests uit te leggen. Hieronder is een tabel en een transcript.

PCR-studie voor hepatitis C: types, indicaties, transcript

Virale hepatitis C is een ernstige ziekte die optreedt met leverschade. Bij tachtig procent van de patiënten gaat het over in een chronische vorm. Het virus vermenigvuldigt zich in levercellen - hepatocyten - en veroorzaakt hun dood. Dood weefsel wordt vervangen door brandpunten van bindweefsel, er ontwikkelt zich fibrose.

Met de ontwikkeling van leverfibrose in staat is zijn functie uit te voeren, begint cirrose, die gevaarlijk zijn voor de complicaties ervan is: het verhogen van de druk in de poortader, gastro-intestinale bloeden, verstoorde bloedstolling, mentale veranderingen als gevolg van de hersenen kernen toxische producten beschadigen.

De oorzaak van de ziekte is infectie met een virus uit de Flaviviridae-familie, een soort RNA-virus. Dit betekent dat het genetische materiaal waarmee eiwitten van de pathogeen worden gesynthetiseerd wordt gecodeerd in een molecuul van ribonucleïnezuur. Infectie gebeurt door het bloed, seksueel, en van een zwangere vrouw naar de foetus. Helaas kan tussen infectie en het begin van de productie van antilichamen een vrij grote hoeveelheid tijd verstrijken - van twee weken tot zes maanden. Dit laat niet toe om de infectie te bepalen met de methode van enzymimmunoassay en start de behandeling in de vroege stadia.

Wat is PCR-analyse?

PCR is een methode voor moleculaire analyse waarmee het genetische materiaal van het pathogeen al in de eerste week na infectie kan worden gedetecteerd met behulp van een polymerasekettingreactie. De studie heeft een hoge specificiteit en nauwkeurigheid en maakt het niet alleen mogelijk de aanwezigheid of afwezigheid van het virus te bepalen, maar ook de concentratie en het genotype.

Neem voor de studie het bloed van de patiënt, waarin het RNA van het virus mogelijk kan worden gevonden. In het bloed worden primers toegevoegd - kunstmatig gesynthetiseerde delen van het gewenste gen van kleine lengte, en RNA-polymerase is een speciaal enzym dat de hoeveelheid genetisch materiaal van het pathogeen vermenigvuldigt. Met behulp van een speciaal apparaat worden verschillende cycli van verwarmen en koelen uitgevoerd. Het materiaal wordt vervolgens geanalyseerd en vergeleken met bekende virusgenen, op basis waarvan een conclusie wordt getrokken over de aan- of afwezigheid van een infectie.

Typen PCR-analyse voor hepatitis C

Er zijn drie soorten PCR-analyse:

  1. Kwalitatieve PCR-analyse. De eerste fase van het onderzoek. Hiermee kunt u het genetisch materiaal van het virus in het bloed identificeren.

  • Kwantitatieve analyse van PCR. Hiermee kan de virale last worden bepaald - de concentratie van het genetisch materiaal van de ziekteverwekker in één milliliter bloed. Deze studie wordt uitgevoerd vóór het begin van de therapie en vervolgens op de eerste, vierde, twaalfde en (als de cursus lang duurt) de vierentwintig week van de behandeling om de effectiviteit ervan te evalueren.

  • genotypering. De veroorzaker van hepatitis C muteert vaak en snel. Op de planeet werden zeven varianten van het genotype van dit virus gevonden. In Rusland zijn het eerste, tweede en derde type gebruikelijk. Elk van de genotypes heeft verschillende weerstand tegen therapie, bijvoorbeeld, de effectiviteit van de behandeling van het eerste type is zestig procent, en voor het tweede en derde deel bereikt het vijfentachtig. Daarom is het, om geschikte geneesmiddelen te selecteren en een behandelingsduur van voldoende duur voor te schrijven, nodig om exact te bepalen met welk type virus de patiënt is geïnfecteerd.
  • Indicaties voor PCR-analyse voor hepatitis C

    PCR-onderzoek wordt voorgeschreven in de volgende gevallen:

    • contact met een zieke persoon, die tot infectie kan leiden;
    • positieve enzymgekoppelde immunoassay;
    • verschijnselen van levercirrose: veranderingen in levergrootte, vergrote milt, verschijning van subcutane veneuze plexus op de buik;
    • het optreden van symptomen van leverschade: pijn in de rechterkant van de buik, gele verkleuring van de huid;
    • verhoogde activiteit van ALT en AST in biochemische bloedanalyse;
    • voordat de behandeling wordt gestart om de virale lading te bepalen;
    • om de effectiviteit van antivirale therapie te controleren;
    • na voltooiing van de behandeling om terugval te volgen;
    • in aanwezigheid van gediagnosticeerde hepatitis B, om gemengde leverschade uit te sluiten.

    Decodering van PCR-studie voor hepatitis C

    Decodering van PCR-analyse en enzymimmunoassay voor hepatitis C dient te worden geadresseerd door een hepatoloog of specialist in besmettelijke ziekten. Analyse van de resultaten van PCR is noodzakelijk in combinatie met biochemisch bloedonderzoek, biopsie en echografie. Alleen een gekwalificeerde arts kan de resultaten van de onderzoeken analyseren en op basis daarvan de juiste behandeling voorschrijven.

    Decodering van kwalitatieve analyse.

    Het genetische materiaal van het pathogeen werd gevonden in het geanalyseerde biologische materiaal. Infectie is bevestigd.

    Er is geen infectie of de hoeveelheid RNA van het pathogeen ligt onder de gevoeligheidslimiet.

    Decodering van kwantitatieve analyse.

    Een normaal cijfer voor gezonde mensen. Het betekent dat er geen hepatitis C-RNA in het testmateriaal zit of dat de concentratie onder de gevoeligheidsdrempel van het onderzoek ligt.

    Concentratie van RNA ligt onder het bereik van kwantificering. Dergelijke resultaten worden zeer voorzichtig geïnterpreteerd, correleren ze met de gegevens van andere onderzoeken en voeren vaak een tweede onderzoek uit.

    Het niveau van virale lading bij een gegeven concentratie wordt als laag beschouwd. Gewoonlijk betekent een afname van de hoeveelheid virus dat de therapie succesvol is.

    Meer dan 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Het niveau van virale lading bij een gegeven concentratie wordt als hoog beschouwd.

    Meer dan 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    De hoeveelheid RNA ligt boven de bovengrens van het kwantificeringsbereik. Doe met dit resultaat geen conclusies over de mate van virale lading. Meestal wordt in dergelijke gevallen de test herhaald met de verdunning van het bloedmonster.

    Decoderen van genotypering.

    RNA van een specifiek genotype werd gedetecteerd

    In het biomateriaal wordt hepatitis C-virus van een specifiek genotype en subtype gedetecteerd. Het resultaat is gecodeerd in Romeinse cijfers en Latijnse letters, bijvoorbeeld - 1a, 2b. Er zijn zeven genotypes en zevenenzestig subtypen, maar in Rusland zijn er maar drie eerste typen.

    Hepatitis C-virus-RNA werd gedetecteerd

    In het bloed is RNA een zeldzaam genotype voor Rusland gevonden, dat niet kan worden toegeschreven aan het eerste, tweede of derde type. Meer onderzoek is nodig.

    Dit resultaat geeft aan dat de patiënt gezond is of dat het RNA-niveau van het pathogeen te klein is.

    Een situatie is mogelijk wanneer de PCR-analyse voor hepatitis C negatief is en de enzymimmuuntest antilichamen tegen het virus detecteert. Dit betekent dat de patiënt hepatitis C in acute vorm heeft gehad en zichzelf heeft genezen. Ongeveer twintig gevallen van infectie resulteren in spontane genezing als het lichaam van de patiënt voldoende weerstand tegen infectie uitoefent.

    Ondanks het feit dat PCR een zeer nauwkeurige analyse is, kunnen de resultaten daarvan in de volgende situaties worden vervormd:

    • bloed werd onder ontoereikende omstandigheden naar het laboratorium getransporteerd, het temperatuurregime werd geschonden;
    • het monster van het biomateriaal was verontreinigd;
    • in het bloed waren er restsporen van heparine en andere anticoagulantia;
    • In de onderzochte stof waren remmers - stoffen die de polymerasekettingreactie vertragen of stoppen.

    Voordelen van PCR ten opzichte van andere methoden

    1. Diagnose in de vroege stadia. PCR detecteert het genetische materiaal van de veroorzaker van de ziekte. Met behulp van immunofluorescentieanalyse is het mogelijk om alleen immunoglobulines te bepalen - stoffen die het lichaam produceert als reactie op een infectie. In het geval van hepatitis C-infectie kan het interval tussen infectie en het begin van een immuunrespons enkele weken en maanden zijn, op welk moment ELISA niet effectief zal zijn. PCR geeft al een antwoord in de eerste week na infectie.

  • Lage kans op fouten. In het bestudeerde materiaal wordt het genetische materiaal bepaald, dat alleen kenmerkend is voor één type pathogenen. Hiermee kunt u valse resultaten uitsluiten. Met ELISA zijn fouten mogelijk, omdat dezelfde soort antilichamen kunnen worden vrijgegeven tegen verschillende virussen - dergelijke antilichamen worden kruisreactief genoemd.

  • Hoge gevoeligheid. PCR kan RNA van het pathogeen zelfs in minimale hoeveelheden detecteren. Dit maakt het mogelijk om verborgen infecties te identificeren.
  • Voorbereiding op bloedafgifte voor PCR-onderzoek

    Voor PCR-analyse wordt veneus bloed verzameld voor hepatitis C. Gewoonlijk worden twee delen bloed onmiddellijk uit de ader van de patiënt genomen: de eerste wordt verzonden voor PCR en de tweede voor ELISA. Dit wordt gedaan om nauwkeuriger te kunnen beoordelen hoe ernstig de patiënt is geïnfecteerd met het virus en hoe de immuniteit hiertegen vecht.

    Meestal zijn de volgende regels van de patiënt vereist:

    • een bloedtest wordt 's morgens afgenomen;
    • de pauze tussen de laatste maaltijd en de aflevering van bloed moet acht tot tien uur zijn;
    • twee of drie dagen voor de analyse moet je gefrituurd en vet voedsel en alcohol opgeven;
    • vierentwintig uur vóór de analyse moet de patiënt fysieke inspanning vermijden: draag geen gewichten, ga niet naar een sportschool of zwembad.

    Wat toont de kwantitatieve analyse voor hepatitis C?

    Het diagnosticeren van leverziekten door externe tekenen of pijn is moeilijk.

    Dit komt door de eigenaardigheid van het orgaan, dat praktisch geen zenuwuiteinden heeft en geduldig is met verschillende kwalen.

    Dus dingen zijn met hepatitis - in de beginfase onderscheiden ze zich op geen enkele manier, alleen met de ontwikkeling van de ziekte kan geelzucht verschijnen, de temperatuur kan stijgen en een lichte pijn in het levergebied kan worden gevoeld.

    Om een ​​behandelmethode nauwkeurig te diagnosticeren en te kiezen, kan een arts een aantal tests voorschrijven: van een bloedtest op antilichamen tegen echografie van de lever.

    Maar hepatitis zelf wordt gediagnosticeerd door bloed, alle aanvullende onderzoeken zijn hoofdzakelijk ontworpen om te begrijpen hoeveel het virus de lever heeft beschadigd.

    Tijdens de sessie kan de arts u een kwantitatieve analyse van hepatitis C geven. In dit artikel zullen we bespreken waarom hij is toegewezen, hoe verloopt, de mogelijke resultaten en hun decodering. Aan het einde van het artikel vindt u een geschatte prijs voor bloeddonatie voor analyse.

    Wat is het?

    Zo'n onderzoek wordt uitgevoerd om te begrijpen hoeveel moleculen van het virus in het lichaam aanwezig zijn

    Een kwantitatieve analyse is een bloedtest voor de aanwezigheid van hepatitis. Het laat zien hoe cellen in het lichaam worden geïnfecteerd met een virus, of de ziekte zich ontwikkelt of niet.

    Dat wil zeggen, het toont de concentratie of belasting van hepatitis C-RNA in het menselijk lichaam in eenheden per milliliter of 1 kubieke centimeter bloed.

    Daarentegen helpt kwalitatieve analyse alleen de aanwezigheid van RNA-virussen te bepalen.

    In welke gevallen doen ze het?

    Het onderzoek wordt parallel met een kwalitatieve analyse uitgevoerd nadat een bloedtest op de aanwezigheid van antilichamen tegen hepatitis (EIA) een positief resultaat liet zien. Doe het meerdere keren:

    • met de eerste diagnose van hepatitis C alvorens te beslissen over de keuze van de behandeling;
    • tijdens de behandeling van de ziekte (gewoonlijk na 1, 4, 12 en 24 weken) om het klinische beeld van de resultaten van de therapie te bepalen;
    • na behandeling om terugval te bepalen.

    Het belang van

    Kwantitatieve analyse is een van de belangrijkste soorten onderzoek waarop een arts vertrouwt bij het kiezen van methoden voor de behandeling van hepatitis. Het dient om:

    1. Om te begrijpen hoeveel het organisme is geïnfecteerd met het virus, de kwantitatieve aanwezigheid van antigenen in het lichaam.
    2. De effectiviteit van de geselecteerde therapie.
    3. Kies een behandelmethode en maak een voorspelling.

    Tegelijkertijd laat deze analyse ons niet toe om de mate van leverschade of de ernst van het ziekteverloop voor het organisme te beoordelen. Gebruik hiervoor andere onderzoeken, bijvoorbeeld biochemisch bloedonderzoek, elastometrie, biopsie en andere.

    Methode en voorwaarden voor implementatie

    Bloedafname uit de ader gebeurt meestal 's morgens. Vanwege het gebruik van polymerasekettingreactie (PCR), kan deze studie een van de meest nauwkeurige worden genoemd op het gebied van virusdefinitie.

    Zonder het gebruik van wetenschappelijke terminologie, kan het proces als volgt worden beschreven: het biomateriaal wordt gemengd met bepaalde enzymen die het kopiëren van RNA-enzymen of DNA van het virus mogelijk maken. Dus doe tot genoeg van deze moleculen om de ziekteverwekker te identificeren.

    De periode voor het afgeven van de resultaten verschilt afhankelijk van de medische instelling en de werklast. Resultaten kunnen worden opgesomd 4-5 uur na het begin van het onderzoek. Daarom kan het resultaat al de volgende dag na de bloedafname worden gegeven.

    Hoe moderner het laboratorium, de apparatuur en de reagentia, hoe nauwkeuriger en sneller de resultaten kunnen worden verkregen

    Voorbereiding op bloeddonatie

    De levering van het biomateriaal voor de analyse komt uit de lijn. Er zijn geen speciale aanbevelingen voor de bereiding, daarom zijn de standaardregels die moeten worden nageleefd voordat bloed doneren voor onderzoek relevant:

    1. Doe het 's morgens op een lege maag beter (de laatste maaltijd mag niet eerder zijn dan 8-12 uur voor de bevalling).
    2. Als de bloedafname niet in de ochtend plaatsvindt, dan kunt u voor het ontbijt geen vet voedsel eten (het interval van 8-12 uur moet ook in acht worden genomen).
    3. Geef 1-2 dagen voor de test alcohol, vet en gefrituurd voedsel op.
    4. Kom de dag na het feestelijke feest niet voor analyse.
    5. Roken is ten minste één uur vóór de levering van het biomateriaal verboden.
    6. Voordat u bloed inneemt, moet u 10-15 minuten in vrede zitten om het lichaam te ontspannen, en de invloed op de resultaten van stress, zowel fysiek als psychologisch, uitsluiten.
    7. Als u medicijnen of soortgelijke preparaten gebruikt, kan de test 10-14 dagen na de laatste toediening worden ingenomen. (dit feit moet aan de arts worden gemeld, misschien zal hij een andere aandoening vaststellen).
    8. Biomateriaal geeft niet op onmiddellijk na het rectale onderzoek, radiografie, fysiotherapie procedures.
    9. Initiële en heranalyse kunnen het beste worden uitgevoerd in hetzelfde laboratorium (medische instelling), zodat ze verschillende reagentia, apparatuur, meeteenheden en nauwkeurigheid kunnen gebruiken.

    Uitleg van resultaten

    Afhankelijk van het niveau van de virusconcentratie in het lichaam, worden verschillende conclusies getrokken met betrekking tot de therapie van de ziekte

    Bepaal vervolgens de effectiviteit van de behandeling. Als een tweede analyse van de virusbelasting minder is dan 8 * 105 IE / ml, dan kan worden gesteld dat therapie in de goede richting is en in de strijd tegen de ziekte is er succes.

    Er wordt gesproken over een vroege virologische respons als de kwantitatieve aanwezigheid van RNA van het virus afneemt op de derde dag van de behandeling. Maar de kans hierop is op het niveau van 85%.

    Als de indicator echter meer is 8 * 105 IE / ml, dan moet de arts het behandelplan beoordelen en een geschiktere keuze kiezen. Hoe hoger het niveau, hoe sterker het virus het lichaam raakt en hoe slechter de prognose.

    De resultaten in verschillende laboratoria kunnen worden aangegeven in IE / ml of in kopieën per ml. De conversiefactor is anders (variërend van ongeveer 1 tot 5) en is afhankelijk van de methode die wordt gebruikt om de kwantitatieve indicator te bepalen. In de praktijk wordt algemeen aangenomen dat 1 IE / ml = 4 kopieën per ml.

    Zijn er fouten?

    Helaas kan de diagnose onjuist zijn. Maar dit is alleen als de medische instelling verouderde apparatuur gebruikt, onjuiste reagentia, dan zijn enkele van de verkeerde resultaten aanwezig.

    Dergelijke factoren kunnen ook invloed hebben op:

    • aanwezigheid van heparine of remmers in het bloed;
    • contaminatie van het biomateriaal in de loop van het onderzoek.

    Met de juiste voorbereiding voor analyse in moderne behandelingscentra is deze kans vrijwel nul.

    Met wie moet ik contact opnemen en wat zijn de kosten

    Als u een vermoeden van hepatitis heeft, dient u contact op te nemen met een viroloog, een specialist in besmettelijke ziekten of een hepatoloog. Indien nodig zullen ze u naar andere artsen sturen.

    De prijs van dergelijke studies kan verschillen. Bovendien hangt het af van de marges van de diagnosecentra zelf, en van de complexiteit van werk, apparatuur, enz.

    In moderne laboratoria kan men dat 2900-3000 roebel (1350-1400 UAH) zonder de kosten van het nemen van bloed uit de ader. Er zijn ook klinieken die een analyse bieden van 300 roebel (ongeveer 140 UAH).

    De geschatte vorm van de analyseresultaten ziet er als volgt uit

    conclusie

    Om de resultaten van het artikel samen te vatten, zullen we de belangrijkste punten schetsen:

    1. Een kwantitatieve analyse van hepatitis C vereist de studie van bloed naar de aanwezigheid van cellen van het virus met vermelding van de belasting.
    2. De indicator wordt gemeten in eenheden per milliliter of 1 kubieke centimeter bloed.
    3. De analyse wordt zowel in de initiële diagnose als in de follow-up uitgevoerd om de effectiviteit van de geselecteerde therapie te bepalen of om een ​​terugval te detecteren.
    4. Het laat niet toe te spreken over het niveau van levergezondheid, dat wordt geschonden als een gevolg van infectie met het hepatitis C-virus.Daarbij kunnen gelijktijdige onderzoeken worden uitgevoerd: biochemische bloedanalyse, elastometrie, biopsie, enz.
    5. In principe vindt bloeddonatie 's morgens plaats, het biomateriaal wordt uit de ader gehaald.
    6. Het wordt niet aanbevolen om te roken, alcohol, vet of gefrituurd voedsel te drinken voordat u de test uitvoert. Tegelijkertijd is de instemming met de regels voor de voorbereiding van het onderzoek zoals gespecificeerd in het artikel welkom.
    7. Als de analyse aantoont dat de plasma-belasting van het virus meer is 600 IE / ml, toen was er een infectie en ontwikkeling van hepatitis C in het lichaam.
    8. In het geval dat herhaalde analyses een grotere laten zien 8 * 105 IE / ml, de arts zou het schema en de behandelingsmethoden moeten herzien. Dit duidt op het gebrek aan effectiviteit van de geselecteerde therapie.
    9. De kans op fouten bij kwantitatief onderzoek is uiterst klein. Het is echter mogelijk om het biomateriaal, de aanwezigheid van remmers of heparine daarin te besmetten, wat de analyse onwaar zal maken.
    10. De lagere drempel van de kosten van de procedure - 300 roebel (zonder de prijs van bloedafname) en groeit afhankelijk van de gebruikte reagentia, apparatuur in het laboratorium en andere factoren.

    № 350СВ, kwantitatieve bepaling van hepatitis C-virus-RNA door de PCR-methode (virale belasting) (HCV-virale lading, hepatitis C-virus-RNA (kwantitatieve test)) in bloedserum

    Bepaling van hepatitis C-virus-RNA in serum door polymerase-kettingreactie (PCR) met real-time detectie.

    het detecteerbare fragment is een specifiek gebied van het hepatitis C-virus-RNA; de specificiteit van de bepaling is 100%. De gevoeligheid van de bepaling is 60 IE / ml Lineair bereik: 10 ^ 2 - 1x10 ^ 8 IU / ml.

    • Positieve kwalitatieve test voor de aanwezigheid van RNA van hepatitis C-virus in het bloedserum.
    • Bepaling van virale lading.
    • Bepaling van de tactiek van het behandelen van patiënten.
    • Nauwkeurige evaluatie van de effectiviteit van de behandeling.

    Interpretatie van de resultaten van het onderzoek bevat informatie voor de behandelende arts en is geen diagnose. Informatie uit deze sectie kan niet worden gebruikt voor zelfdiagnose en zelfbehandeling. Een nauwkeurige diagnose wordt gesteld door de arts, waarbij zowel de resultaten van deze enquête als de nodige informatie uit andere bronnen worden gebruikt: anamnese, de resultaten van andere onderzoeken, enz.

    Maateenheden: de hoeveelheid RNA van hepatitis C-virus, uitgedrukt in IE / ml. Om opnieuw te berekenen in kopieën / ml, moet de verhouding IE = 2,5 kopie van HCV-RNA worden toegepast.

    • Basisinformatie
    • Voorbeelden van resultaten

    * de deadline omvat niet de dag waarop het biomateriaal wordt ingenomen

    PCR met real-time detectie.

    voorbeelden van resultaten op het formulier *

    * Wij vestigen uw aandacht op het feit dat bij het bestellen van meerdere onderzoeken meerdere testresultaten op één formulier kunnen worden weergegeven.

    In dit gedeelte kunt u erachter te komen hoeveel de uitvoering van het onderzoek in uw stad, lees de beschrijving van de test en de interpretatie van de resultaten tafel. Bij het kiezen van de "kwantitatieve bepaling van hepatitis C-virus-RNA door HCV Viral Load (HCV Viral Load) in serum" in Moskou en andere Russische steden, vergeet dan niet dat de prijs van de analyse, de kosten van de bemonsteringsprocedure voor biomateriaal, methoden en timing van onderzoek in regionale medische kantoren kunnen verschillen.

    Medinfo.club

    Portaal over lever

    Kwantitatieve analyse van HCV en de interpretatie ervan

    Hepatitis C is een ziekte die zich kan reproduceren in gezonde levercellen en proliferatieve ziekten kan veroorzaken. In de wereld van vandaag, wanneer het hepatitis B-virus was specifieke mutatie, het menselijke immuunsysteem staat onder druk, in vergelijking met de infectie, is te verwaarlozen. Het is ook vermeldenswaard dat niet alle patiënten de eerste tekenen van de ziekte zullen hebben, vooral in de vroege stadia.

    RNA-analyse van het hepatitis C-virus is een kwantitatief onderzoek, waarvan de norm een ​​matige hoeveelheid van de aanwezigheid van virale cellen in het bloed van de patiënt is. Volgens de statistieken zijn ongeveer 31% van de patiënten volledig genezen van deze aandoening, als deze zich in de beginfase bevindt.

    In de medische praktijk merken artsen dat 4 miljoen geïnfecteerde symptomen en de eerste tekenen helemaal niet verschijnen, hoewel een verwaarloosde vorm van hepatitis kan leiden tot cirrose van de lever of kanker.

    Momenteel wordt tijdens de procedure van "bloedtransfusie" dit bloed gecontroleerd op de aanwezigheid van het hepatitis C-virus, omdat deze ziekte wordt overgedragen via donorbloed.

    Tot op heden heeft de wereld al medicijnen ontwikkeld tegen hepatitis C met een efficiëntie van bijna 100%. De moderne farmaceutische industrie heeft geneesmiddelen ontwikkeld die vrijwel geen bijwerkingen hebben. Veel patiënten krijgen de eerste resultaten in de vorm van verlichting van de symptomen en vermindering van de virale last na een week nemen. Lees meer over preparaten van hepatitis van Indiase fabricage in ons afzonderlijke artikel.

    In de markt van bedrijven voor het vervoer van Indiase medicijnen tegen hepatitis C "Sofosbuvir Express" heeft zichzelf bewezen. Dit bedrijf helpt mensen met succes om te herstellen van een kwaal van meer dan 2 jaar. Opmerkingen en video's van tevreden patiënten die u hier kunt zien. Ze zijn goed voor meer dan 4000 mensen die hersteld zijn door aangeschafte medicijnen. Stel uw gezondheid niet uit in een lange box, ga naar www.sofosbuvir-express.com of bel het nummer 8-800-200-59-21

    Typen PCR-onderzoeken

    PCR (polymerasekettingreactie) is de meest moderne en effectieve methode om het gen van het virus en de mogelijkheden ervan te bestuderen. Dergelijke diagnostiek kan een verscheidenheid van de ziekte vaststellen en de verdere mutatie ervan in het lichaam van de patiënt bepalen.

    De analyse wordt uitgevoerd door bloed te nemen, dat vervolgens in speciale reagentia wordt geplaatst, waarin het kloneren van cellen plaatsvindt.

    Twee cellen worden geproduceerd uit één cel, enzovoort. Dientengevolge verschijnen honderden DNA's, waardoor het mogelijk is om de ziekteverwekker te diagnosticeren en het virus in een vroeg stadium te identificeren.

    Daarom is PCR verdeeld in verschillende typen:

    • kwalitatieve analyse - herkent de genen van een infectie in het bloed. Als een patiënt wordt bevestigd voor een kwalitatieve analyse, moet een kwantitatieve analyse worden uitgevoerd om de mate van infectie vast te stellen. Als een resultaat van deze diagnose schrijven specialisten "gedetecteerd / niet gedetecteerd". "Ontdekt" - geeft aan dat de aandoening in het lichaam aanwezig is en dat het RNA al is gedetecteerd. "Niet gedetecteerd" geeft aan dat er geen virusgen in het monster zit, dat wil zeggen dat er geen hepatitis-RNA is. Maar artsen raden aan om na 10 dagen een tweede onderzoek uit te voeren.
    • kwantitatieve analyse - bepaalt de hoeveelheid genetisch materiaal van de infectie in het bloed. Dergelijke diagnostiek helpt om de ernst van de ziekte en de hele klinische geschiedenis vast te stellen. Als resultaat van een dergelijke analyse kan alleen "Positief / Negatief / Ongeldig" worden geschreven. "Positief" - geeft de besmettelijke lading weer. Artsen gebruiken deze methode voor het diagnosticeren van de ziekte om de effectiviteit van de behandeling na 4, 12, 16 en 24 weken van de ziekte te bepalen.Als de virusscore in het bereik van 8x10t IU / ml ligt, dan is de behandeling effectief, als de indicatoren hoger zijn, dan nee. "Negatief" - het gen van infectie wordt niet gevonden. "Ongeldig" - dit gebeurt als het gen van het virus kwalitatief wordt gevonden, maar het wordt niet onthuld in een kwantitatieve analyse. Er is een soortgelijk als de infectie onder het niveau ligt.

    Verschillen in kwalitatieve en kwantitatieve analyses

    Hepatitis C-virus - wordt voornamelijk gediagnosticeerd via een kwantitatieve analyse, waarvan het decoderen noodzakelijk is voor de juiste interpretatie van de ziekte. Maar ondanks dit, de kwalitatieve en kwantitatieve methode voor de diagnose hebben hun verschillen, zoals de rol en taken van onderzoek - kwalitatieve - bevestigt de aanwezigheid van infecties na de ontdekking van het virus antilichamen en kwantitatieve - een secundaire methode voor het weerleggen of bevestigen van de ziekte met het oog op de juiste en enige diagnose te stellen.

    Uitleg van kwantitatief onderzoek

    Na de diagnose kunnen alleen de artsen het resultaat interpreteren, omdat het niet in cijfers maar in woorden moet worden weergegeven. Volgens de statistieken is kwantitatieve PCR de gevoeligste analyse. Om te begrijpen of een virus in het lichaam aanwezig is, is het noodzakelijk om te begrijpen en te weten dat de kwantitatieve analyse van hepatitis C wordt ontcijferd door middel van een digitale indicatie van de infectie:

    PCR-diagnostiek gebruiken

    Polymerase-kettingreactie (PCR) in de moleculaire biologie wordt de experimentele methode voor virusdetectie genoemd. Het maakt het mogelijk om de concentratie van bepaalde fragmenten van nucleïnezuur (DNA) in monsters van biologisch materiaal aanzienlijk te verhogen, wat het mogelijk maakt ze te bepalen (herkennen) en te tellen.

    De analyse wordt als volgt uitgevoerd. Genetisch materiaal (een bloedmonster), dat mogelijk het gewenste gen kan bevatten, wordt in een reageerbuis ingebracht. Ook daar worden primers geplaatst - chemisch gesynthetiseerde kleine lengten van het gewenste gen.

    Het DNA- of RNA-polymerase wordt ook aan het vat toegevoegd, het is in staat om een ​​nucleïnezuurketen te bouwen die volledig identiek is aan de oorspronkelijke. Een reeks van vier vrije nucleotiden, een speciaal bouwmateriaal voor RNA of DNA, waarvan er één radioactieve deeltjes van fosfor bevat, wordt ook in de resulterende samenstelling ingebracht.

    Het resulterende mengsel wordt verwarmd tot 95-96 ° C, waardoor de twee DNA-helices, die in de gebruikelijke toestand zijn verweven, worden ontrafeld. Vervolgens wordt het preparaat gekoeld, op dit moment hechten de primers zich aan het gewenste gebied van het virusgenoom, zonder toe te staan ​​dat RNA (of DNA) opnieuw een dubbele helix vormt.

    Tijdens het afkoelen zoekt het polymerase naar een vrije keten van nucleotiden. Voor de werking van dit enzym is een enkele keten van nucleotiden nodig. Omdat het polymerase langs de DNA-streng slipt (zoals een ring met een touw), kan het niet werken op een dubbele helix.

    Hierna wordt een herhaalde verwarmingscyclus uitgevoerd, waardoor de nucleotide-ketens worden gescheiden. Voor elk van deze PCR-cycli neemt de hoeveelheid van het gewenste hepatitis-gen in het monster toe in een geometrische progressie, en de rest van het genetische materiaal wordt lineair geproduceerd.

    Na het zuiveren van de oplossing van de nucleotide-residuen en het scheiden van de DNA-strengen door de molecuulgewichtsparameter van de elektroforese, is het gemakkelijk om te bepalen of het gewenste gen in het testmonster aanwezig is of niet.

    Voordelen van PCR

    Een laboratoriumonderzoek met behulp van de PCR-methode maakt het mogelijk om nog meer informatie te verkrijgen dan alleen de aanwezigheid van het RNA-virus. Bij het bepalen van de parameter van het niveau van radioactieve straling, is het mogelijk om te bepalen welke hoeveelheid genetisch materiaal aanvankelijk in het onderzochte monster aanwezig was. Stel in geval van hepatitis het niveau van de virale lading vast.

    Een ander voordeel van deze methode is de zeer hoge gevoeligheid van de CR-reactie. Het is veel hoger dan de klassieke methoden voor het detecteren van virussen. In het ideale geval is, om het gewenste gen te identificeren, slechts één virus in het monster voldoende voor PCR.

    Bovendien is PCR volledig specifiek. De primers zijn zo gemaakt dat ze volledig overeenkomen met de unieke delen van de gewenste genen, die geen enkele andere sequentie heeft. Beide vingerafdrukken zijn uniek en in elk gen zijn er unieke sequenties van nucleotiden.

    Kwalitatieve PCR-analyse

    Kwalitatieve analyse onthult alleen de aanwezigheid van een virus in het bloed. Deze test moet worden uitgevoerd voor alle patiënten waarvan is vastgesteld dat ze antilichamen tegen hepatitis C in hun bloed hebben Het resultaat kan slechts één van de twee waarden zijn: "gedetecteerd" of "niet gedetecteerd". Bij een gezond persoon moet de norm (referentiewaarde) "niet gedetecteerd" worden.

    Er is ook een speciale interpretatie van dergelijke resultaten van het uitgevoerde kwalitatieve onderzoek:

    • Het resultaat is "ontdekt". Dit betekent dat het monster van biologisch materiaal die werd gevonden door een RNA-fragment dat specifiek is voor het hepatitis C-virus Bijgevolg is het feit van de patiënt met hepatitis B virusinfectie bij C. Indien het resultaat van de kwalitatieve PCR "ontdekt", betekent dit dat het virus repliceert en op dit moment infecteert het nieuwe levercellen in het lichaam.
    • Het resultaat is "niet gedetecteerd". Dergelijke uitspraak geeft aan dat in het monster van biologisch materiaal verkregen RNA-fragment wordt niet gedetecteerd in het laboratorium, dat specifiek is voor hetzij HCV RNA dezelfde concentratie van het pathogeen infectie in het monster was beneden de gevoeligheid van de test.

    In de acute fase van het hepatitis C-virus-RNA kunnen kwalitatieve onderzoeken met behulp van de PCR-techniek na 1-2 weken onmiddellijk na infectie van het lichaam worden aangetoond, dat wil zeggen lang voordat antilichamen tegen de hepatitis zelf verschijnen.

    Onbetrouwbare resultaten van analyses van een dergelijk onderzoek kunnen worden verkregen met:

    • besmet biomateriaal;
    • aanwezigheid van heparine in het bloed van de patiënt;
    • aanwezigheid in het monster van chemische of eiwitstoffen (remmers) die verschillende componenten van PCR beïnvloeden.

    Voor de kwalitatieve analyse van PCR is een speciale voorbereiding van de patiënt voor het onderzoek niet vereist. Veneus bloed wordt als materiaal gebruikt.

    Evaluatie van resultaten

    Kwalitatieve PCR-tests hebben een zekere gevoeligheid, en afhankelijk van de nauwkeurigheid van het onderzoek, kan het niveau van apparatuur in het laboratorium variëren van 10 tot 500 IE / ml.

    Dit betekent dat als het virus in het bloedmonster aanwezig is in een zeer lage concentratie (minder dan de gevoeligheidsdrempel van het gegeven laboratorium), de patiëntpatiënt kan worden bepaald als "niet gedetecteerd". Hierdoor wanneer zij de kwalitatieve analyse van PCR met lage viremie (virus lage concentratie), bijvoorbeeld voor patiënten die behandeling van antivirale therapie, is het belangrijk te weten, en de drempelwaarde van de gevoeligheid van het diagnosesysteem.

    Varianten van diagnostische systemen

    Om de virologische respons te controleren, wordt antivirale behandeling aanbevolen voor het gebruik van diagnostische systemen met een sensitiviteitsdrempel van ten minste 50 IE / ml. Deze voorwaarden wordt voldaan, bijvoorbeeld: analysatoren Cobas Ampicolor HCV Test (c nauwkeurigheid van 50 IU / ml) en RealBest HCV RNA (met een gevoeligheid van 15 IU / ml).

    Volgens de WHO voor het vaststellen van een definitieve diagnose van hepatitis C moet berusten op basis van drievoudige detectie van RNA virus in serummonsters van een patiënt zonder andere soorten hepatitis marker.

    Naast PCR-methoden wordt ook een TMA-onderzoek (transcriptionele amplificatiemethode) gebruikt om HCV-RNA bij patiënten te detecteren. Het heeft de beste gevoeligheidsdrempel (5-10 IE / ml), maar in ons land is deze testmethode nog niet heel gebruikelijk.

    Het bereik van gedetecteerde wijzigingen van virussen

    Deze kwalitatieve bepaling in het serum van de aanwezigheid van RNA van hepatitis C-virus maakt het mogelijk om verschillende genotypen van dit virus te bepalen. Momenteel kent de wetenschap meer dan zes genotypen van dit virus, evenals ongeveer 10 subtypen van de ziekte.

    Virussen van 1, 2, 3 genotypen komen vaak voor in ons land. Laboratoria kunnen de volgende genotypen identificeren: 1a en 1b, 2a, 2b en 2c, en 3, 4, 5a en 6, ongeacht subtypes. Voor alle virusmodificaties is de specificiteit van de detectie 100%.

    Kwantitatieve analyse van PCR

    Met behulp van een kwantitatieve PCR-test wordt het niveau van de hepatitis-virusconcentratie in bloedmonsters bepaald (virale lading). Met deze test voor viremie (de concentratie van het virus) kunt u het aantal eenheden bepalen van een specifiek genetisch materiaal (het meest virale RNA), dat in een bepaalde hoeveelheid wordt gedetecteerd. Bepaal in dit geval de concentratie in 1 ml, wat overeenkomt met 1 cu. cm.

    De kwantitatieve parameters van de analyse zijn uitgedrukt in cijfers, voor dit gebruik als maateenheid internationale eenheden (IU) per milliliter (ml), aangegeven als ME / ml. Nu kan in sommige laboratoria de hoeveelheid van het virus in andere eenheden worden bepaald: het aantal kopieën per ml wordt aangeduid als kopieën / ml.

    • Timing Voor hepatitis C wordt een dergelijke kwantitatieve analyse van PCR uitgevoerd net voor het begin van de therapie. Dan op de 1e, 4e, 12e en 24e week. Evaluatie op de 12e week is indicatief, het maakt het mogelijk om de effectiviteit van de therapie te bepalen.
    • Voorbereiding voor analyse. Voor de kwantitatieve analyse van PCR is een speciale voorbereiding van de patiënt voor het onderzoek niet vereist. Een half uur voor het nemen van monsters mag u niet roken. Veneus bloed wordt gebruikt als laboratoriummateriaal.

    Evaluatie van resultaten

    Voor verschillende laboratoriumtestsystemen zijn er verschillende conversiefactoren voor deze indicator in IE / ml. Gemiddeld wordt een conversieparameter gebruikt, waarbij 4 kopieën / ml = 1 IU / ml. Dat is bijvoorbeeld het geval als het laboratorium het resultaat van PCR-analyse 2,4 * 10 6 kopieën / ml geeft, dan moet deze parameter worden gedeeld door 4 en krijgen we 6 * 10 5 IU / ml.

    Een hoog ladingsniveau van 800.000 IU / ml wordt als hoog beschouwd, wat ongeveer equivalent is aan een index van 3.000.000 kopieën / ml. Lage viremie komt, volgens sommige auteurs, overeen met de parameters van kwantitatieve PCR lager dan 400.000 IU / ml.

    Als resultaat van de kwantitatieve test kunnen de eindresultaten niet in de vorm van een digitale waarde worden geleverd, maar: "onder het meetbereik" of "niet gedetecteerd".

    • Evaluatie: "onder het meetbereik". Dit geeft aan dat de kwantitatieve test geen hepatitis C-viraal RNA kon detecteren, maar het virus zelf is in zeer kleine concentraties in het lichaam aanwezig. Dit wordt aangegeven door een aanvullende kwalitatieve test, die het feit van de aanwezigheid van het virus bevestigt.
    • Evaluatie: "niet gedetecteerd". Dit resultaat geeft aan dat de kwantitatieve test geen virus in het RNA-monster detecteerde.

    De parameter van de virale lading, in de eerste plaats, bepaalt de mate van infectiviteit van de ziekte, het niveau van "infectiousness" van de patiënt. Hoe hoger de concentratie van het virus door de patiënt, hoe groter de kans dat het aan andere mensen wordt overgedragen. Bijvoorbeeld wanneer u seks hebt met een zieke persoon of een verticaal pad. Zo'n kwantitatieve indicator helpt ook om de effectiviteit van de behandeling van de patiënt te bepalen.

    Het uitvoeren van een kwantitatieve analyse van PCC is belangrijk voor antivirale therapie, het evalueren van het succes ervan en het plannen van de duur van de cursus. Dus, met de snelle reactie van het lichaam op de behandeling en een lage graad van viremie, kan de duur van de therapie worden verminderd.

    Met een langzame afname van de kwantitatieve PCR-parameter moet antivirale therapie worden uitgebreid of aangepast. Als het niveau van de virale last laag is, dan is dit een gunstige factor van de therapie, als deze hoog is, dan is de toegepaste behandelmethode niet effectief en moeten geneesmiddelen of methoden voor het gebruik ervan worden gewijzigd.


    Gerelateerde Artikelen Hepatitis