PCR-diagnostiek gebruiken

Share Tweet Pin it

Polymerase-kettingreactie (PCR) in de moleculaire biologie wordt de experimentele methode voor virusdetectie genoemd. Het maakt het mogelijk om de concentratie van bepaalde fragmenten van nucleïnezuur (DNA) in monsters van biologisch materiaal aanzienlijk te verhogen, wat het mogelijk maakt ze te bepalen (herkennen) en te tellen.

De analyse wordt als volgt uitgevoerd. Genetisch materiaal (een bloedmonster), dat mogelijk het gewenste gen kan bevatten, wordt in een reageerbuis ingebracht. Ook daar worden primers geplaatst - chemisch gesynthetiseerde kleine lengten van het gewenste gen.

Het DNA- of RNA-polymerase wordt ook aan het vat toegevoegd, het is in staat om een ​​nucleïnezuurketen te bouwen die volledig identiek is aan de oorspronkelijke. Een reeks van vier vrije nucleotiden, een speciaal bouwmateriaal voor RNA of DNA, waarvan er één radioactieve deeltjes van fosfor bevat, wordt ook in de resulterende samenstelling ingebracht.

Het resulterende mengsel wordt verwarmd tot 95-96 ° C, waardoor de twee DNA-helices, die in de gebruikelijke toestand zijn verweven, worden ontrafeld. Vervolgens wordt het preparaat gekoeld, op dit moment hechten de primers zich aan het gewenste gebied van het virusgenoom, zonder toe te staan ​​dat RNA (of DNA) opnieuw een dubbele helix vormt.

Tijdens het afkoelen zoekt het polymerase naar een vrije keten van nucleotiden. Voor de werking van dit enzym is een enkele keten van nucleotiden nodig. Omdat het polymerase langs de DNA-streng slipt (zoals een ring met een touw), kan het niet werken op een dubbele helix.

Hierna wordt een herhaalde verwarmingscyclus uitgevoerd, waardoor de nucleotide-ketens worden gescheiden. Voor elk van deze PCR-cycli neemt de hoeveelheid van het gewenste hepatitis-gen in het monster toe in een geometrische progressie, en de rest van het genetische materiaal wordt lineair geproduceerd.

Na het zuiveren van de oplossing van de nucleotide-residuen en het scheiden van de DNA-strengen door de molecuulgewichtsparameter van de elektroforese, is het gemakkelijk om te bepalen of het gewenste gen in het testmonster aanwezig is of niet.

Voordelen van PCR

Een laboratoriumonderzoek met behulp van de PCR-methode maakt het mogelijk om nog meer informatie te verkrijgen dan alleen de aanwezigheid van het RNA-virus. Bij het bepalen van de parameter van het niveau van radioactieve straling, is het mogelijk om te bepalen welke hoeveelheid genetisch materiaal aanvankelijk in het onderzochte monster aanwezig was. Stel in geval van hepatitis het niveau van de virale lading vast.

Een ander voordeel van deze methode is de zeer hoge gevoeligheid van de CR-reactie. Het is veel hoger dan de klassieke methoden voor het detecteren van virussen. In het ideale geval is, om het gewenste gen te identificeren, slechts één virus in het monster voldoende voor PCR.

Bovendien is PCR volledig specifiek. De primers zijn zo gemaakt dat ze volledig overeenkomen met de unieke delen van de gewenste genen, die geen enkele andere sequentie heeft. Beide vingerafdrukken zijn uniek en in elk gen zijn er unieke sequenties van nucleotiden.

Kwalitatieve PCR-analyse

Kwalitatieve analyse onthult alleen de aanwezigheid van een virus in het bloed. Deze test moet worden uitgevoerd voor alle patiënten waarvan is vastgesteld dat ze antilichamen tegen hepatitis C in hun bloed hebben Het resultaat kan slechts één van de twee waarden zijn: "gedetecteerd" of "niet gedetecteerd". Bij een gezond persoon moet de norm (referentiewaarde) "niet gedetecteerd" worden.

Er is ook een speciale interpretatie van dergelijke resultaten van het uitgevoerde kwalitatieve onderzoek:

  • Het resultaat is "ontdekt". Dit betekent dat het monster van biologisch materiaal die werd gevonden door een RNA-fragment dat specifiek is voor het hepatitis C-virus Bijgevolg is het feit van de patiënt met hepatitis B virusinfectie bij C. Indien het resultaat van de kwalitatieve PCR "ontdekt", betekent dit dat het virus repliceert en op dit moment infecteert het nieuwe levercellen in het lichaam.
  • Het resultaat is "niet gedetecteerd". Dergelijke uitspraak geeft aan dat in het monster van biologisch materiaal verkregen RNA-fragment wordt niet gedetecteerd in het laboratorium, dat specifiek is voor hetzij HCV RNA dezelfde concentratie van het pathogeen infectie in het monster was beneden de gevoeligheid van de test.

In de acute fase van het hepatitis C-virus-RNA kunnen kwalitatieve onderzoeken met behulp van de PCR-techniek na 1-2 weken onmiddellijk na infectie van het lichaam worden aangetoond, dat wil zeggen lang voordat antilichamen tegen de hepatitis zelf verschijnen.

Onbetrouwbare resultaten van analyses van een dergelijk onderzoek kunnen worden verkregen met:

  • besmet biomateriaal;
  • aanwezigheid van heparine in het bloed van de patiënt;
  • aanwezigheid in het monster van chemische of eiwitstoffen (remmers) die verschillende componenten van PCR beïnvloeden.

Voor de kwalitatieve analyse van PCR is een speciale voorbereiding van de patiënt voor het onderzoek niet vereist. Veneus bloed wordt als materiaal gebruikt.

Evaluatie van resultaten

Kwalitatieve PCR-tests hebben een zekere gevoeligheid, en afhankelijk van de nauwkeurigheid van het onderzoek, kan het niveau van apparatuur in het laboratorium variëren van 10 tot 500 IE / ml.

Dit betekent dat als het virus in het bloedmonster aanwezig is in een zeer lage concentratie (minder dan de gevoeligheidsdrempel van het gegeven laboratorium), de patiëntpatiënt kan worden bepaald als "niet gedetecteerd". Hierdoor wanneer zij de kwalitatieve analyse van PCR met lage viremie (virus lage concentratie), bijvoorbeeld voor patiënten die behandeling van antivirale therapie, is het belangrijk te weten, en de drempelwaarde van de gevoeligheid van het diagnosesysteem.

Varianten van diagnostische systemen

Om de virologische respons te controleren, wordt antivirale behandeling aanbevolen voor het gebruik van diagnostische systemen met een sensitiviteitsdrempel van ten minste 50 IE / ml. Deze voorwaarden wordt voldaan, bijvoorbeeld: analysatoren Cobas Ampicolor HCV Test (c nauwkeurigheid van 50 IU / ml) en RealBest HCV RNA (met een gevoeligheid van 15 IU / ml).

Volgens de WHO voor het vaststellen van een definitieve diagnose van hepatitis C moet berusten op basis van drievoudige detectie van RNA virus in serummonsters van een patiënt zonder andere soorten hepatitis marker.

Naast PCR-methoden wordt ook een TMA-onderzoek (transcriptionele amplificatiemethode) gebruikt om HCV-RNA bij patiënten te detecteren. Het heeft de beste gevoeligheidsdrempel (5-10 IE / ml), maar in ons land is deze testmethode nog niet heel gebruikelijk.

Het bereik van gedetecteerde wijzigingen van virussen

Deze kwalitatieve bepaling in het serum van de aanwezigheid van RNA van hepatitis C-virus maakt het mogelijk om verschillende genotypen van dit virus te bepalen. Momenteel kent de wetenschap meer dan zes genotypen van dit virus, evenals ongeveer 10 subtypen van de ziekte.

Virussen van 1, 2, 3 genotypen komen vaak voor in ons land. Laboratoria kunnen de volgende genotypen identificeren: 1a en 1b, 2a, 2b en 2c, en 3, 4, 5a en 6, ongeacht subtypes. Voor alle virusmodificaties is de specificiteit van de detectie 100%.

Kwantitatieve analyse van PCR

Met behulp van een kwantitatieve PCR-test wordt het niveau van de hepatitis-virusconcentratie in bloedmonsters bepaald (virale lading). Met deze test voor viremie (de concentratie van het virus) kunt u het aantal eenheden bepalen van een specifiek genetisch materiaal (het meest virale RNA), dat in een bepaalde hoeveelheid wordt gedetecteerd. Bepaal in dit geval de concentratie in 1 ml, wat overeenkomt met 1 cu. cm.

De kwantitatieve parameters van de analyse zijn uitgedrukt in cijfers, voor dit gebruik als maateenheid internationale eenheden (IU) per milliliter (ml), aangegeven als ME / ml. Nu kan in sommige laboratoria de hoeveelheid van het virus in andere eenheden worden bepaald: het aantal kopieën per ml wordt aangeduid als kopieën / ml.

  • Timing Voor hepatitis C wordt een dergelijke kwantitatieve analyse van PCR uitgevoerd net voor het begin van de therapie. Dan op de 1e, 4e, 12e en 24e week. Evaluatie op de 12e week is indicatief, het maakt het mogelijk om de effectiviteit van de therapie te bepalen.
  • Voorbereiding voor analyse. Voor de kwantitatieve analyse van PCR is een speciale voorbereiding van de patiënt voor het onderzoek niet vereist. Een half uur voor het nemen van monsters mag u niet roken. Veneus bloed wordt gebruikt als laboratoriummateriaal.

Evaluatie van resultaten

Voor verschillende laboratoriumtestsystemen zijn er verschillende conversiefactoren voor deze indicator in IE / ml. Gemiddeld wordt een conversieparameter gebruikt, waarbij 4 kopieën / ml = 1 IU / ml. Dat is bijvoorbeeld het geval als het laboratorium het resultaat van PCR-analyse 2,4 * 10 6 kopieën / ml geeft, dan moet deze parameter worden gedeeld door 4 en krijgen we 6 * 10 5 IU / ml.

Een hoog ladingsniveau van 800.000 IU / ml wordt als hoog beschouwd, wat ongeveer equivalent is aan een index van 3.000.000 kopieën / ml. Lage viremie komt, volgens sommige auteurs, overeen met de parameters van kwantitatieve PCR lager dan 400.000 IU / ml.

Als resultaat van de kwantitatieve test kunnen de eindresultaten niet in de vorm van een digitale waarde worden geleverd, maar: "onder het meetbereik" of "niet gedetecteerd".

  • Evaluatie: "onder het meetbereik". Dit geeft aan dat de kwantitatieve test geen hepatitis C-viraal RNA kon detecteren, maar het virus zelf is in zeer kleine concentraties in het lichaam aanwezig. Dit wordt aangegeven door een aanvullende kwalitatieve test, die het feit van de aanwezigheid van het virus bevestigt.
  • Evaluatie: "niet gedetecteerd". Dit resultaat geeft aan dat de kwantitatieve test geen virus in het RNA-monster detecteerde.

De parameter van de virale lading, in de eerste plaats, bepaalt de mate van infectiviteit van de ziekte, het niveau van "infectiousness" van de patiënt. Hoe hoger de concentratie van het virus door de patiënt, hoe groter de kans dat het aan andere mensen wordt overgedragen. Bijvoorbeeld wanneer u seks hebt met een zieke persoon of een verticaal pad. Zo'n kwantitatieve indicator helpt ook om de effectiviteit van de behandeling van de patiënt te bepalen.

Het uitvoeren van een kwantitatieve analyse van PCC is belangrijk voor antivirale therapie, het evalueren van het succes ervan en het plannen van de duur van de cursus. Dus, met de snelle reactie van het lichaam op de behandeling en een lage graad van viremie, kan de duur van de therapie worden verminderd.

Met een langzame afname van de kwantitatieve PCR-parameter moet antivirale therapie worden uitgebreid of aangepast. Als het niveau van de virale last laag is, dan is dit een gunstige factor van de therapie, als deze hoog is, dan is de toegepaste behandelmethode niet effectief en moeten geneesmiddelen of methoden voor het gebruik ervan worden gewijzigd.

Kosten van bloedonderzoek en PCR voor hepatitis C

Hepatitis C is een inflammatoire pathologie waarbij de levercellen worden aangetast. De ziekte ontstaat door de penetratie van het hepatitis C-virus (HVC) in het menselijk lichaam.

De vorm van de ziekte kan acuut of chronisch zijn.

Meestal symptomen van acute vormen van de ziekte, de meeste patiënten niet beschikbaar zijn, soms de ziekte gaat gepaard met pijn in de buik, verminderde prestaties, toegenomen vermoeidheid, eetstoornissen, donkere schaduw van urine, verkleuring van ontlasting, gele kleur van de huid en slijmvliezen, gewrichtspijn. Er zijn 6 tot 8 weken na infectie symptomen zoals regel, maar deze kunnen zich na zes maanden manifesteren.

Met de ontwikkeling van dergelijke verschijnselen is het noodzakelijk om een ​​aanvraag voor een medische instelling in te dienen en een uitgebreid onderzoek van het hele organisme te ondergaan. Als onderdeel van een medisch onderzoek wordt een bloedtest voor hepatitis C uitgevoerd.

Tegenwoordig is het, met behulp van moderne diagnostische technieken, mogelijk om deze pathologie in het beginstadium van ontwikkeling te identificeren, wat de kansen op een volledige genezing van de ziekte aanzienlijk vergroot.

Analyse van hepatitis C is verplicht voor de volgende groepen mensen:

  • vrouwen in de periode van het dragen van een kind;
  • personen met tekenen van hepatitis;
  • werknemers van medische instellingen;
  • potentiële donoren van organen en bloed;
  • drugsverslaafden, met hiv besmette personen, personen die een ongeordend, intiem leven leiden.

Lijst met noodzakelijke onderzoeken

Welke tests moet ik nemen met hepatitis C? Om een ​​ziekte nauwkeurig te diagnosticeren, de oorzaken vast te stellen en de conditie van het leverparenchym te bepalen, is het noodzakelijk om de volgende onderzoeken uit te voeren:

  • algemene analyse van urine en bloed;
  • biochemische bloedanalyse;
  • PCR-analyse;
  • bloedtest voor de detectie van antilichamen tegen HVC;
  • een bloedtest voor beschikbare antilichamen tegen zijn eigen hepatische cellen;
  • een leverbiopsie.

De interpretatie van de bloedtest voor hepatitis C wordt uitgevoerd door een specialist. Laten we elke onderzoeksmethode in meer detail bekijken, en we zullen ook begrijpen wat voor soort analyse voor hepatitis C het meest accuraat is.

Algemene analyse

Bij het uitvoeren van een algemene bloedtest op hepatitis C, kunt u de toestand van de patiënt beoordelen. Veranderingen in bloedtellingen worden niet gezien als specifieke symptomen van hepatitis, maar met deze ziekte zijn er schendingen zoals:

  • de concentratie van hemoglobine, bloedplaatjes en leukocyten neemt af;
  • het gehalte aan lymfocyten neemt toe;
  • bloedcoagulatie is verstoord;
  • de snelheid van erythrocytsedimentatie (ESR) neemt toe.

De algemene analyse van urine maakt het mogelijk om in zijn samenstelling urobeline te detecteren - een galpigment dat in de urine verschijnt als gevolg van een defect van de lever.

Biochemische analyse

Biochemische analyse van bloed bij hepatitis C stelt ons in staat om dergelijke schendingen te identificeren als:

  • verhoogde leverenzymen (alanine transaminase - ALT en AST - AST) die het bloed voeren wanneer beschadigde hepatocyten. In de normale toestand zouden deze indicatoren bij mannen niet hoger mogen zijn dan 37 IE / l, bij vrouwen - niet hoger dan 31 IE / l. Verhoogde concentratie van ALT en AST bij hepatitis C, asymptomatische, vaak het enige symptoom van de ziekte. Bovendien verhoogt de bloedspiegel glutamyl alkalische fosfatase (gewoonlijk niet meer dan 150 IU / l).
  • het gehalte aan bilirubine (zowel totaal als direct) in het bloed wordt overschreden. Als het niveau van het gele pigment in het serum hoger zijn dan 27-34 umol / L, geelzucht optreden (tot 80 mol / l op een eenvoudige wijze, 86-169 pmol / L - matig boven 170 mmol / l - ernstige vorm).
  • Verminderde het niveau van albuminen, de concentratie van gamma-globulines, in tegendeel, toegenomen. Gamma-globulines bestaan ​​uit immunoglobulines - antilichamen, die het lichaam beschermen tegen ziekteverwekkers.
  • verhoogde concentratie van triglyceriden in het bloed.

PCR-onderzoek

Met behulp van de PCR-techniek is het mogelijk om een ​​pathogeen te diagnosticeren. Het uitvoeren van deze analyse maakt het mogelijk om een ​​virus in het bloed te detecteren, zelfs als de hoeveelheid ervan minimaal is. PCR analyse van hepatitis C toelaat de bestaande infectie reeds bepaald na 5 dagen na infectie, dat wil zeggen, lang voordat de antilichamen verschijnen.

Als het resultaat van een bloedtest op hepatitis C met de PCR-methode positief is, duidt dit op de aanwezigheid van een actieve infectie in het lichaam. Met behulp van deze methode kan een kwalitatieve en kwantitatieve studie van HVC RNA worden uitgevoerd.

In de loop van de kwalitatieve analyse van PCR voor hepatitis C is het mogelijk om een ​​bestaand virus in het menselijk lichaam te detecteren.

Een dergelijke diagnostische procedure wordt uitgevoerd als een anti-HVC in het bloed wordt gedetecteerd.

De transcriptie van de analyse voor hepatitis C bevat informatie dat de infectie in het lichaam wordt gedetecteerd of niet wordt gedetecteerd. In de normale toestand worden pathologische stoffen in het bloed niet gedetecteerd.

Als de analyse voor hepatitis C een positief resultaat geeft, geeft dit aan dat het pathogene micro-organisme continu verdeeld is en de hepatische cellen beïnvloedt.

De resultaten van een dergelijke analyse kunnen onbetrouwbaar zijn, het is mogelijk in de volgende gevallen:

  • verontreiniging van het gebruikte biomateriaal;
  • als er heparine in het bloed zit;
  • in de aanwezigheid van chemische of proteïnestoffen (remmers) in het biomateriaal dat wordt onderzocht, en die de elementen van PCR beïnvloeden.

De kwantitatieve analyse van hepatitis C geeft informatie over de hoeveelheid van het virus in het bloed, dat wil zeggen, het bepaalt de virale last. Deze term betekent de hoeveelheid HVC-RNA die in het bloed aanwezig is (bijv. 1 ml). In de interpretatie van de kwantitatieve analyse voor hepatitis C wordt deze waarde uitgedrukt in een digitaal equivalent, gemeten in IE / ml.

Bloed voor PCR in hepatitis C wordt vóór de therapeutische maatregelen genomen. Nadat de analyse is uitgevoerd na 1, 4, 12 en 24 weken. De studie in week 12 is indicatief en wordt uitgevoerd om de effectiviteit van lopende behandelingsprocedures te beoordelen.

Als de analyse van hepatitis C tijdens de zwangerschap positief is en de virale last wordt overschreden, is het risico van overdracht van ziekteverwekkers van de zieke moeder op het kind meerdere malen toegenomen. Ook is, met verhoogde virale belastingswaarden, de implementatie van therapeutische maatregelen moeilijk.

Volgens de analyse van hepatitis C is de virusbelasting hoger dan 800 000 IE / ml als deze hoger is. Als de cijfers lager zijn dan 400.000 IE / ml, wordt het niveau van virale lading als laag beschouwd.

De analyse van hepatitis C met behulp van de PCR-methode wordt als de meest accurate beschouwd en heeft verschillende voordelen ten opzichte van andere onderzoeksopties, namelijk:

  • directe diagnose van de ziekteverwekker. Bij het uitvoeren van traditionele studies, wordt de aanwezigheid van eiwitmarkers, die de producten zijn van de vitale activiteit van pathogene stoffen, bepaald. Er staat alleen dat de infectie in het bloed aanwezig is. Wanneer de analyse voor hepatitis C wordt uitgevoerd met behulp van de PCR-methode, is het mogelijk om het type veroorzaker van een gevaarlijke pathologie te bepalen.
  • specificiteit van de methodologie. Tijdens deze procedure wordt een uniek DNA-gebied geïdentificeerd in het biomateriaal dat overeenkomt met slechts één type pathogeen. Dit maakt het mogelijk om de kans op het verkrijgen van onbetrouwbare resultaten te minimaliseren.
  • hoge gevoeligheid. Bij het uitvoeren van PCR-analyse kan een minimale hoeveelheid van het virus worden gedetecteerd. Dit is belangrijk als conditioneel pathogene stoffen worden geïdentificeerd die alleen een bedreiging vormen als hun niveau wordt verhoogd.
  • bij gebruik van deze techniek kunnen verschillende pathogenen in één biomateriaalmonster worden gedetecteerd.
  • het is mogelijk om verborgen infecties te detecteren. Bovendien kunt u met de analyse ziekteverwekkers diagnosticeren die in cellen leven en een hoge antigene variabiliteit hebben.

Als de resultaten van de studie positief zijn, worden de sporen van het virus gevonden in het biomateriaal, waarna het netwerk in het lichaam een ​​infectie heeft.

Negatieve analyse van PCR voor hepatitis C betekent dat er geen sporen van infectie in het biomateriaal zijn.

Immunologisch onderzoek

Met deze methode kunt u antilichamen tegen alle typen van het hepatitis-virus identificeren, evenals antilichamen tegen de hepatische cellen in uw lichaam, die worden bevorderd door de ontwikkeling van auto-immune hepatitis.

De resultaten die tijdens het onderzoek zijn verkregen, zijn 3 maanden relevant, daarna moet u opnieuw bloed doneren voor hepatitis C.

Het is ook mogelijk om express onderzoek uit te voeren met behulp van speciale teststrips. Deze analyse maakt het mogelijk de antilichamen tegen het virus in het bloed en speeksel te bepalen, een dergelijke procedure kan onafhankelijk thuis worden uitgevoerd.

Lever biopsie

Om een ​​dergelijke analyse uit te voeren, wordt een element van het leverparenchym genomen en wordt een histologisch onderzoek van het resulterende biomateriaal uitgevoerd. Dit stelt ons in staat om de conditie van het orgaan te beoordelen: om inflammatoire, necrotische foci, het stadium van fibrose en dergelijke te identificeren.

Tegenwoordig worden tests gebruikt die de histologische analyse van het leverparenchym vervangen.

Gebruik de specifieke biomerkers van veneus bloed om het stadium van leverschade en de intensiteit van het ontstekingsproces te beoordelen. Met behulp van Fibrotest is het mogelijk om de mate van fibreuze weefselproliferatie vast te stellen.

Bij het uitvoeren van Actitest kan informatie worden verkregen over de intensiteit van pathologische processen in het leverparenchym. Gebruik van Steatotest kan de vette degeneratie van leverweefsel diagnosticeren en de mate van dit proces beoordelen. Fibromax bestaat uit alle bovenstaande tests en kan enkele andere onderzoeken omvatten.

Voorbereiding op de studie

Welke tests worden uitgevoerd voor hepatitis C en hoe dit of dat type onderzoek wordt uitgevoerd, kwamen we te weten. Het is even belangrijk om te weten hoe je je moet voorbereiden op de analyse.

Voor het verkrijgen van betrouwbare resultaten wordt aanbevolen om te voldoen aan de volgende vereisten:

  • Analyses van hepatitis C moeten 's morgens op een lege maag worden ingenomen. De laatste keer dat u voedsel zou moeten eten, minstens 8 uur vóór de test.
  • Biomateriaalbemonstering kan overdag of 's avonds worden uitgevoerd. In zo'n geval is het belangrijk dat er niet minder dan 5-6 uur verstrijken tussen de laatste maaltijd en de analyse.
  • Voordat bloed wordt gedoneerd voor hepatitis C, moeten thee, koffie, sap of andere dranken worden weggegooid, alleen water is toegestaan.
  • 48 uur vóór het onderzoek is het noodzakelijk om de consumptie van vet, gefrituurd voedsel en alcoholhoudende dranken uit te sluiten.
  • Gedurende minstens een uur voordat u de test uitvoert, moet u afzien van roken.
  • Voer de analyse niet onmiddellijk uit na de echografie, instrumenteel, radiologisch onderzoek, een massagesessie of fysiotherapie.
  • een dag voor het onderzoek is vereist om het gebruik van medicatie en intense lichamelijke activiteit uit te sluiten. Emotionele stress is ook gecontra-indiceerd.
  • 15 minuten voordat de test wordt aanbevolen om deze in een stille staat te houden.

Bloedbemonsteringsprocedure

Waar kan ik de test voor hepatitis C doorstaan? De verzameling biomateriaal voor verder onderzoek wordt uitgevoerd in het laboratorium van de medische instelling of bij de patiënt thuis.

Bloed uit de ader wordt als volgt genomen:

  • Met behulp van een speciale bundel rond de onderarm van de patiënt wordt de veneuze bloedstroom opgeheven. Dankzij dergelijke manipulaties worden de aderen gevuld met bloed en zullen ze meer opvallen, wat het inbrengen van de naald aanzienlijk zal vergemakkelijken.
  • Het gedeelte van de huid waar de naald wordt ingebracht, wordt zorgvuldig behandeld met alcohol of alcoholbevattende vloeistof.
  • De naald wordt voorzichtig in de ader ingebracht, waarna een reageerbuis wordt aangebracht die speciaal is ontworpen voor het verzamelen van bloed.
  • onmiddellijk nadat de naald in de ader is ingebracht, wordt de knel-tourniquet uit de hand van de patiënt verwijderd.
  • nadat het nodige volume bloed is verzameld voor de analyse, wordt de naald geleidelijk uit de ader verwijderd.
  • een steriel wattenstaafje of gaasje gedrenkt in alcohol moet op de injectieplaats worden aangebracht.
  • om het begin van een hematoom te voorkomen, moet de tampon met enige moeite worden gedrukt tot aan het gebied waar de naald wordt ingebracht, buig de arm naar het ellebooggewricht en houd deze een aantal minuten vast. Dergelijke acties helpen ook om het bloed snel te stoppen.

Gezien een goede techniek van intern beheer, is deze procedure absoluut veilig en lezen veroorzaakt geen pijnlijke sensaties.

In zeldzame gevallen, na bloedafname, is zwelling van de aderen mogelijk. Dit fenomeen wordt "flebitis" genoemd. Het probleem zal worden verlicht door comprimeren (niet heet), het moet meerdere keren per dag op opgezwollen huidgebieden worden toegepast.

Er kunnen ook bepaalde problemen zijn als er een bloedingsaandoening is. Het gebruik van aspirine, warfarine en andere bloedverdunnende medicijnen kan bloedingen veroorzaken. Daarom moet u, voordat u de analyse uitvoert, weigeren om medicijnen in te nemen. Als de behandeling niet kan worden geannuleerd, moet u de specialist hierover informeren.

Voorwaarden en prijzen

Hoeveel analyse wordt er uitgevoerd voor hepatitis C? De resultaten van een bloedtest op hepatitis kunnen binnen enkele uren en over een paar dagen (meestal niet meer dan 8 dagen) klaar zijn. De duur van de voorbereiding van de resultaten hangt af van het type virus en de gekozen analysetechniek. Het onderzoek uitgevoerd met de PCR-methode is sneller. De resultaten in dit geval zijn binnen enkele uren gereed.

Hoeveel is een analyse voor hepatitis C? Afhankelijk van de kliniek en de complexiteit van de studie, kan de prijs van de procedure variëren van 400 tot 11.000 roebel.

Opgemerkt moet worden dat het enkele weken kan duren om een ​​voldoende hoeveelheid antilichamen tegen HVC te vormen. Daarom kan in een vroeg stadium van de ontwikkeling van de pathologie het resultaat van de studie vals-negatief zijn.

Bovendien is het verkrijgen van onnauwkeurige gegevens mogelijk als de analyse slecht wordt uitgevoerd en de transportvoorwaarden voor het ontvangen biomateriaal worden geschonden (de monsters moeten maximaal 2 uur na de bloedafname aan het laboratorium worden afgeleverd).

Als het resultaat van de studie positief is, moet u onmiddellijk een arts met een besmettelijke ziekte raadplegen. De specialist voert een aanvullend onderzoek uit en schrijft de juiste behandeling voor.

Denk je dat het onmogelijk is om hepatitis C te genezen?

Vandaag zal modern drugs en de nieuwe generatie sofosbuvir Daklatasvir met 97-100% waarschijnlijk voor altijd genezen van hepatitis C. De nieuwste medicatie is beschikbaar in het Russisch bij de officiële vertegenwoordiger van de Indiase farmgiganta Zydus Heptiza. De bestelde producten worden binnen 4 dagen geleverd door de koerier, betaling na ontvangst. Ontvang gratis advies over het gebruik van moderne middelen, evenals informatie over hoe u de officiële website van Zydus leverancier kunt kopen in Rusland.

Kwalitatieve analyse voor hepatitis C

Laat een reactie achter

Kwalitatieve analyse van polymerasekettingreactie - PCR voor hepatitis C bepaalt de aanwezigheid of afwezigheid van HCV in het lichaam. In het laboratorium wordt de structuur van het RNA bestudeerd, waarin het virus zich zal bevinden. Als een virus C wordt gedetecteerd, is het noodzakelijk om een ​​behandeling te ondergaan, omdat een verwaarloosde leveraandoening ernstige gevolgen heeft. Kwalitatieve PCR wordt uitgevoerd na herstel om de afwezigheid van antilichamen te bevestigen. Benoemd en voor preventief onderzoek. Bij een lage concentratie van het pathogeen in het bloed kan PCR (kwalitatief) niets detecteren, omdat het diagnosesysteem zijn gevoeligheidsdrempels heeft. In het geval van een eerste stadium van de ziekte of een milde vorm, wordt de PCR uiteindelijk gediagnosticeerd met ultragevoelige apparatuur.

Wat is een RNA-virus?

De term RNA van hepatitis C-virus (of hepatitis C-virus-RNA) wordt zelf leverziekte genoemd. Virus C bindt zich aan een gezonde lichaamscel en dringt binnen. Na verloop van tijd, verspreid door het lichaam, is het alleen om in het bloed te komen. Het gevolg is dat de ziekteverwekker de lever binnendringt, zich vermengt met zijn cellen en hard werkt. Levercellen (hepatocyten) werken onder zijn invloed, ondergaan veranderingen en gaan ten onder. Hoe langer het virus C in de lever zit, hoe meer cellen afsterven. Na verloop van tijd ontwikkelen zich gevaarlijke ziektes die leiden tot kwaadaardige degeneratie en dood.

Infectie van de lever met dit type virus kan op geen enkele manier extern worden gemanifesteerd. Gedurende vele of tientallen jaren voelt de geïnfecteerde persoon zich volledig gezond en alleen een onderzoek per ongeluk onthult meestal een pathologie. Bij het doneren van bloed voor hepatitis wordt een deel van de RNA (ribonucleïnezuur) keten die deel uitmaakt van het menselijke gen (DNA) onderzocht. De resultaten van laboratoriumonderzoek mogen niet worden gebruikt voor zelfbehandeling, omdat dit slechts een indicator is. De arts zal het exacte beeld en de verdere diagnose bepalen.

Wanneer gedaan: getuigenis van de studie

Om de HCV te bevestigen, wordt PCR-analyse (polymerasekettingreactie) toegewezen. PCR-onderzoeken helpen bij het vinden van het pathogeenmateriaal in de RNA-structuur en schrijven effectieve therapie voor. Benoemd in de volgende gevallen:

  • identificatie van tekenen van leverontsteking;
  • screeningstudies voor preventie;
  • onderzoek van contactpersonen;
  • diagnose van hepatitis van gemengde oorsprong (definitie van de belangrijkste ziekteverwekker);
  • Bepaling van het niveau van activiteit van virusreproductie in chronische vorm;
  • cirrose van de lever;
  • om de effectiviteit van de voorgeschreven behandeling te bepalen.
PCR-onderzoeken worden door een arts toegewezen om de effectiviteit van het verloop van de behandeling van hepatitis te bepalen.

Er is zowel een kwalitatieve als een kwantitatieve analyse van PCR. Kwantitatieve PCR toont het percentage RNA met de dragers van het virus in het bloed en de kwalitatieve PCR geeft een virale aanwezigheid of afwezigheid aan. Een positieve indicator van kwaliteit (de aanwezigheid van hepatitis C-RNA) vereist ook een kwantitatief onderzoek. Een hoog concentratieniveau van de pathogeen van hepatitis C hangt samen met het risico van overdracht, dat wil zeggen besmetting van anderen. Lage hoeveelheden worden beter behandeld. De hoeveelheid RNA-virussen in het bloed is niet gerelateerd aan de intensiteit van de ziekte. De PCR-analyse wordt ook uitgevoerd in het geval van interferon-therapie, om de duur en de complexiteit van de behandelingskuur voor te schrijven.

Kenmerken van kwalitatieve PCR-analyse voor hepatitis C

Een kwalitatieve analyse met een polymerasekettingreactie-index wordt toegekend aan alle patiënten die antilichamen tegen hepatitis C in hun bloed hebben. Wie hersteld en hersteld is, moet opnieuw worden getest. Aanbevolen wordt om getest voor hepatitis B en vervolgens, bij een positieve afsluiting, en hepatitis D ook kwalitatief geanalyseerd reakatsiya dient in samenhang met andere bloedonderzoeken worden uitgevoerd. Analyses zullen een compleet beeld geven van de virusverspreiding.

Uit de testresultaten zal alleen een positieve test voor hepatitis C of negatief, dat wil zeggen de aanwezigheid of afwezigheid van het virus, worden gezien. Als de conclusie "wordt gedetecteerd", is en blijft het virus actief acteren. De aanduiding "niet gevonden" geeft de afwezigheid van het virus of de kleine hoeveelheid aan. Met deze indicator moet rekening worden gehouden met het feit dat de analytische gevoeligheid van diagnostische systemen anders is en dat RNA-hepatitis C nog steeds in het bloed kan zijn, maar niet in de analyse kan voorkomen.

Een bijzonder gevoelige methode van PCR ultra-hepatitis C onthult zelfs in kleine hoeveelheden. Een hybridisatie-fluorescente studie wordt gebruikt die vele malen hoger is dan standaard PCR-systemen. De methode wordt in verschillende gevallen gebruikt:

  • verdachte verborgen vormen van hepatitis C;
  • De diagnose van PCR werd niet bevestigd door het pathogeen, maar er zijn antilichamen;
  • in geval van herstel;
  • om het vroege stadium van infectie te identificeren.
Terug naar inhoud

Toelichting op de analyse

De uiteindelijke beslissing in de diagnose wordt beïnvloed door PCR-decodering van HCV, in het bijzonder met ultramethode. Het belangrijkste nadeel van dit onderzoek is de strikte naleving van steriele omstandigheden voor het monster en de materialen. Een kleine afwijking vertoont soms onnauwkeurige conclusies van de analist, compliceert de diagnose en daaropvolgende behandeling. Analyse van PCR voor de bepaling van RNA van hepatitisvirus toont niet altijd het beeld van de ziekte met vertrouwen, soms worden onnauwkeurigheden toegelaten, op beide manieren.

Bij het diagnosticeren van het hepatitis-virus wordt aanbevolen een uitgebreid onderzoek uit te voeren.

Norm van indicatoren

De afwezigheid van JgM-antilichamen tegen RNA bij virale hepatitis C wordt beschouwd als de norm bij de analyse van de polymerasekettingreactie. Tegelijkertijd wijzen de bevindingen van serologische analyse op de aanwezigheid van antilichamen tegen het virus C en dit ligt ook binnen de grenzen van de norm. Een kwalitatieve definitie toont niet de intensiteit van de ziekte, het onthult alleen de veroorzaker van hepatitis C in RNA. Een dergelijke analyse wordt na de behandeling herhaald om het daadwerkelijke herstel te bevestigen.

afwijkingen

Als JgM-antilichamen tegen HCV-RNA aanwezig zijn, duidt dit op een zich ontwikkelende infectie. De ziekte is acuut of chronisch, manifesteert zich in verschillende stadia. Als een afname van het aantal antilichamen wordt geregistreerd, geeft de analyse aan dat de resultaten van de behandeling tijdens het herstel zijn behaald. Er zijn uiterst zeldzame gevallen van vals positieve bevindingen in de diagnose. Ze zijn te vinden bij vrouwen tijdens de zwangerschap en bij mensen met andere besmettelijke ziekten.

Kwalitatieve en kwantitatieve analyse van PCR voor hepatitis C: negatief, positief, decodering

Hepatitis C is een virale aandoening van de lever die wordt veroorzaakt door het flavivirus HCV (van het Engelse hepatitis C-virus), dat een ribonucleïnezuur (RNA) -molecuul bevat. RNA draagt ​​de genetische code van het virus. De aanwezigheid ervan maakt de analyse van PCR voor hepatitis C mogelijk.

Het gevaar van HCV voor mensen is dat het zogenaamde serologische venster (het tijdsinterval tussen infectie en het optreden van een reactie van het immuunsysteem) vrij lang kan zijn - van enkele weken tot zes maanden.

Dit onthult de infectie niet en start de behandeling op tijd.

Afhankelijk van de individuele kenmerken van het lichaam van de gastheer, kan HCV zich manifesteren in een acute vorm en zich ook ontwikkelen als een chronische ziekte die langdurige en dure behandeling vereist. Bij het opsporen van antilichamen tegen HCV, worden een aantal laboratoriumtests uitgevoerd, waaronder PCR voor hepatitis C. Deze test wordt uitgevoerd voor alle mensen in wier bloed de antilichamen tegen HCV zijn aangetroffen.

Wat is PCR-analyse?

Laboratoriumanalyse van PCR voor hepatitis C - een studie van biologisch materiaal om de aanwezigheid van flavavirus te identificeren.

Polymerase-kettingreactie (zoals de afkorting wordt ontcijferd) toont de kwantitatieve waarde van de virale schade van het organisme, de kwalitatieve kenmerken ervan, en ook het genotype van het virus-bevattende RNA.

Op basis hiervan, evenals op basis van aanvullende analyses, worden de methode en duur van de therapie bepaald, evenals de epidemiologische factor (het risico van overdracht op een andere vervoerder).

Wat is RNA-analyse voor hepatitis C?

De hepatitis C-PCR wordt ook RNA-analyse (HCV-RNA) genoemd, omdat deze niet bekend is. Flavavirus bevat een RNA-deeltje met een viriongrootte van 30-60 nm. Een van de kenmerken van dit micro-organisme is een hoge neiging tot mutaties.

Elk van de ondersoorten (genotypes) van het virus heeft verschillende resistentie, wat verschillende behandelingsmethoden en de aard van de verdere prognose voor de patiënt veroorzaakt.

Biologisch materiaal (veneus bloed) wordt behandeld vasten en meestal getest door Real-Time PCR (zeer gevoelige real-time diagnose aan de ondergrens van 15 IU / ml werd bepaald met de geautomatiseerde gesloten systeemmodus).

Er zijn andere tests, bijvoorbeeld COBAS AMPLICOR met een gevoeligheid van 50-100 IU / ml. Voor elk laboratoriumonderzoek is de gevoeligheidsdrempel belangrijk, d.w.z. het vermogen van het reagens om de minimale concentratie van het virus in het biologische materiaal te detecteren.

Typen analyse voor hepatitis C met behulp van de PCR-methode

PCR voor hepatitis C omvat drie belangrijke componenten:

  • kwalitatieve analyse;
  • kwantitatieve analyse;
  • genotypering.

Deze tests kunnen de aard van viremie bepalen, evenals de genetische tekenen van de ziekteverwekker. Afhankelijk van de gevoeligheid van het diagnosesysteem, wordt de test eenmaal uitgevoerd en soms wordt een tweede test met een gevoeliger reagens uitgevoerd om de resultaten te bevestigen of te verfijnen.

Hoogwaardige hepatitis C-PCR

PCR-analyse voor hepatitis C-kwaliteit is een andere veel voorkomende naam voor de polymerasekettingreactiebepaling. De standaardgevoeligheid van de test, die het mogelijk maakt de aanwezigheid van een virale laesie te detecteren, ligt in het bereik van 10-500 IU / ml.

Negatieve analyse van PCR voor hepatitis C toont aan dat de concentratie van het virus in het bloed van de patiënt lager is dan de drempel van de gevoeligheid van het diagnostische systeem.

Als kwalitatieve PCR een "niet-gedetecteerd" antwoord gaf, dan is het voor de daaropvolgende behandeling belangrijk om de gevoeligheidsdrempel van het reagens te kennen.

De eiwitfracties aan flavavirus verschijnen veel later.

Kwantitatieve hepatitis-C-PCR

PCR hepatitis C-kwantitatief is een indicator van een virale belasting die het niveau van concentratie van flavavirus-RNA in het lichaam weerspiegelt. Dit is een indicator die aangeeft hoeveel fragmenten van viraal RNA zich bevinden per kubieke centimeter bloed. De resultaten van het PCR-RNA van hepatitis C in een conventioneel systeem worden uitgedrukt in internationale eenheden per milliliter (IE / ml) en kunnen op verschillende manieren worden geregistreerd, bijvoorbeeld 1,7 miljoen of 1,7 miljoen IE / ml.

Kwantitatieve PCR-diagnose van hepatitis C wordt gegeven aan patiënten vóór het begin van de antivirale therapie en in week 12 van de behandeling om de resultaten van de geselecteerde methode om HCV te bestrijden te evalueren. Virale belasting stelt u in staat om drie belangrijke indicatoren van de ziekte te identificeren:

  • infectiviteit, d.w.z. de mate van risico van transmissie van het virus van de ene drager naar de andere (hoe hoger de concentratie van flavavirus-RNA, hoe groter de kans op het infecteren van een andere persoon, bijvoorbeeld tijdens seksueel contact);
  • methode en effectiviteit van de behandeling;
  • duur en prognose van antivirale therapie (hoe hoger de virale last, hoe langer de behandeling duurt).

Kwantitatieve PCR-diagnose van hepatitis C hangt af van het type laboratoriumtest en de gevoeligheidsdrempel. De ondergrens van de norm wordt meestal beschouwd als maximaal 600.000 IE / ml, de gemiddelde waarde ligt in het bereik van 600.000-700.000 IU / ml. Resultaten van 800.000 IU / ml en hoger worden beschouwd als hoge niveaus van RNA-bevattend virus.

genotypering

Gezien de hoge mutatieactiviteit van HCV in de natuur, is het belangrijk om in het teststadium te bepalen welk genotype van het virus zich in het bloed van de patiënt bevindt. In totaal zijn 11 genotypen van het hepatitis C-virus op de planeet geregistreerd, waaronder veel ondersoorten. Op het grondgebied van de Russische Federatie zijn 1,2 en 3 gebruikelijk.

PCR-RNA van hepatitis C samen met genotypering is een zeer belangrijk onderdeel van de analyse, omdat stelt de arts in staat om de weerstand (resistentie) van het virus te bepalen, geschikte medicijnen te selecteren en een behandelingskuur voor te schrijven.

Genotypering stelt u ook in staat om indirect de conditie van de lever te bepalen. Het 3-genotype van HCV gaat bijvoorbeeld vaak gepaard met steatosis, waarbij vet zich ophoopt in de cellen van het lichaam.

De bloedtest voor PCR in hepatitis C zou een cijfer moeten geven dat het genotype bepaalt. In antwoorden van laboratoria kan worden geschreven "niet getypt" - en dit betekent dat er een virus in het menselijk bloed zit dat niet door het testsysteem wordt bepaald. Dit kan erop duiden dat het genotype niet karakteristiek is voor een bepaald geografisch gebied. In dit geval is het noodzakelijk om de analyse opnieuw te passeren met een hogere gevoeligheid van het diagnosesysteem.

Decodering van PCR-analyse voor hepatitis C

De test voor hepatitis C PCR kan worden gekwantificeerd op basis van de bovenstaande gegevens. Wanneer de resultaten van laboratoriumtests worden ontvangen, worden de volgende gegevens gewoonlijk geschreven:

  • "Found" / "not found" (hoge kwaliteit PCR voor hepatitis C);
  • de hoeveelheid RNA-bevattende fracties, bijvoorbeeld 831.680 IU / ml (kwantitatieve PCR-bepaling);
  • de figuur die het HCV-genotype bepaalt, bijvoorbeeld - 1, 2, 3, 4;
  • de naam van de test is meestal realtime.

Het belangrijkste bij het ontcijferen van de PCR-analyse voor hepatitis C is het tweede item, dat de virale lading toont die de prognose, de methode en de duur van de behandeling bepaalt.

Als PCR-analyse voor hepatitis C negatief is en ELISA positief - wat betekent dit?

Om laboratoriumtests te ontcijferen, is het belangrijk om contact op te nemen met een hepatoloog of specialist in infectieziekten, die de ontvangen informatie zal uitleggen in overeenstemming met het type diagnostisch systeem en de gevoeligheidsdrempel. In de medische praktijk zijn er veel bloedtestgegevens die een persoon zonder medische voorlichting in verwarring kunnen brengen.

Indien bijvoorbeeld de test voor HCV PCR-negatief en positief ELISA, kan worden aangegeven dat op dit moment in het bloed van de patiënt niet HCV, maar voordat hij een acute vorm van hepatitis C. leed Aangenomen wordt dat de positieve-linked immunosorbent assay (ELISA) blijkt dat in het bloed zijn er antilichamen geproduceerd na de invasie van het virus in het verleden. Maar in de moderne medische praktijk ELISA-analyse is niet voldoende betrouwbaar en geeft vaak ongebruikelijke resultaten, zodat artsen gebruiken het als een primaire screening. Bij het diagnosticeren van de ziekte worden specialisten precies door PCR-tests geleid.

Handige video

In de volgende video is het zeer gedetailleerd en interessant om te vertellen wat de essentie van de PCR-methode is, hoe de analyse is voltooid:

conclusie

Veneus bloed wordt meestal gebruikt voor analyse van hepatitis-C-PCR. Meestal is er een dubbele bemonstering van een biologisch materiaal - voor ELISA en direct voor een PCR-test. Voor de juiste testresultaten is naleving van de belangrijkste regels voor laboratoriumbemonstering van biologisch materiaal vereist:

  • bloed voor analyse wordt 's morgens op een lege maag toegediend;
  • tussen het eten en het nemen van bloed moet ten minste 8 uur duren;
  • Voordat u de test doet, moet u ook alcohol en gefrituurd voedsel uitsluiten;
  • Gedurende de dag voordat je bloed geeft, moet je een hoge fysieke inspanning vermijden.

De resultaten van bloedonderzoek zijn meestal de volgende dag klaar.

Analyse van PCR voor hepatitis

PCR OP HEPATITIS C

  1. RNA van hepatitis C ( "PCR-kwaliteit") - detectie in de analyse van bloed is een bewijs van acute of chronische hepatitis C wordt bepaald uit de 2e week van de infectie, verschijnt voor anti-HCV, waarbij de ziekte te diagnosticeren in de vroege stadia. Bepaling van RNA wordt uitgevoerd bij patiënten met acute klinische hepatitis B en patiënten met een positieve test voor hepatitis.
  2. RNA van hepatitis C ("PCR-kwantitatief") - virale belasting - een van de indicatoren voor de effectiviteit van antivirale therapie en de evaluatie ervan (door het niveau te veranderen van de beginwaarde). De kwantitatieve karakterisering van het gehalte aan hepatitis C-RNA is belangrijk voor het evalueren van de effectiviteit van antivirale therapie en is van prognostisch belang voor het bepalen van de chroniciteit. Patiënten met hoge virale lading (grote hoeveelheden RNA) vóór de behandeling reageren slechter op de behandeling.
  3. RNA van hepatitis C (genotypen 1, 2, 3) - Het type behandeling hangt af van het type en de effectiviteit ervan. De ziekte veroorzaakt door het virus van genotype 1 is het meest ongunstig met betrekking tot de prognose van de effectiviteit van therapie. Volgens de huidige aanbevelingen moet vóór het begin van de antivirale therapie een bloedtest voor ons genotyping van hepatitis C worden uitgevoerd.
  4. RNA van hepatitis C (uitgebreide genotypering 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - op het grondgebied van Rusland circuleren 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a subtypes. Hepatitis C, veroorzaakt door het virus van genotypen 1 en 4, is het meest ongunstig met betrekking tot de prognose.
  5. Ultrasensitieve PCR voor hepatitis C (kwalitatieve methode) - de analyse wordt gebruikt om de ziekte te diagnosticeren in de vroege stadia van infectie, is optimaal voor het testen van bloeddonatie en het beoordelen van de respons op antivirale behandeling. Deze studie, zelfs bij afwezigheid van antilichamen tegen het hepatitis C-virus, wordt aanbevolen voor patiënten met een leverziekte van niet-gespecificeerde oorzaak, met verworven immuundeficiëntie of met immunosuppressieve therapie.
  6. Ultrasensitieve PCR voor hepatitis C (kwantitatieve methode) - unieke analyse met hoge gevoeligheid (10 IU / ml) voor de bepaling van hepatitis C-virus-RNA in kwantitatieve termen. De studie wordt gebruikt om de effectiviteit van de therapie te controleren.

PCR OP HEPATITIS B

  1. Hepatitis B DNA (kwalitatieve analyse) - de index van de reproductie van het hepatitis B-virus, verschijnt eerst in het bloed, gemiddeld 1 maand na infectie. In sommige gevallen is het de enige marker van latente HBV-infectie. Bepaling van het DNA van het virus maakt het mogelijk om hepatitis B te diagnosticeren veroorzaakt door mutante stammen, waarin andere markers van infectie niet worden gedetecteerd.
  2. Hepatitis B-DNA (kwantitatieve analyse) - DNA-concentratie (virale lading) is een van de tests die wordt gebruikt om het stadium van chronische hepatitis B en de werkzaamheid van antivirale therapie te bepalen. De analyse wordt vóór en tijdens de behandeling uitgevoerd.
  3. Genotypering van hepatitis B - ziekten veroorzaakt door verschillende genotypen van het virus kunnen verschillen in het klinische beloop en de uitkomst. Hepatitis B, veroorzaakt door het virus van genotype C, neemt vaak een chronisch beloop en heeft een hoog risico op transformatie naar cirrose van de lever of hepatocellulair carcinoom. Patiënten geïnfecteerd met genotype A-virus reageren beter op de behandeling.
  4. Ultrasensitieve DNA-PCR voor hepatitis B (kwalitatieve methode) - geeft ze over voor een vroege detectie van de ziekte. Zeer informatief in de studie van donorbloed. Kan worden gebruikt om spontane of door behandeling geïnduceerde verwijdering van het virus uit het menselijk lichaam te bevestigen.
  5. Ultrasensitieve PCR voor hepatitis C (kwantitatieve methode) - diagnose van hepatitis B-virus-DNA in kwantitatieve termen. De analyse wordt uitgevoerd om de effectiviteit van de therapie te evalueren.
  6. Bepaling van mutaties van resistentie tegen antivirale geneesmiddelen lamivudine, telbivudine, entecavir, adefovir, tenofovir (gegeven samen met de analyse van "hepatitis B-kwantitatief DNA"). Om de analyse te doorstaan, is het noodzakelijk voor patiënten met chronische hepatitis B vóór het begin van de antivirale therapie en tijdens de toediening van geneesmiddelen. Het resultaat bevat informatie over de beschikbaarheid van resistentie tegen hepatitis B-virus tegen antivirale geneesmiddelen:
    • R - het virus is resistent tegen het antivirale geneesmiddel (resistentiemutaties tegen dit geneesmiddel zijn gedetecteerd);
    • S - het hepatitis B-virus is gevoelig voor het medicijn (de morele waarde, resistentie-mutaties worden niet gedetecteerd);
    • I - de veroorzaker van een infectie kan resistentie tegen dit medicijn veroorzaken.

PCR-analyse voor hepatitis met decodering

Hepatitis C is een virale aandoening van de lever die wordt veroorzaakt door het flavivirus HCV (van het Engelse hepatitis C-virus), dat een ribonucleïnezuur (RNA) -molecuul bevat. RNA draagt ​​de genetische code van het virus. De aanwezigheid ervan maakt de analyse van PCR voor hepatitis C mogelijk.

Het gevaar van HCV voor mensen is dat het zogenaamde serologische venster (het tijdsinterval tussen infectie en het optreden van een reactie van het immuunsysteem) vrij lang kan zijn - van enkele weken tot zes maanden.

Dit onthult de infectie niet en start de behandeling op tijd.

Afhankelijk van de individuele kenmerken van het lichaam van de gastheer, kan HCV zich manifesteren in een acute vorm en zich ook ontwikkelen als een chronische ziekte die langdurige en dure behandeling vereist. Bij het opsporen van antilichamen tegen HCV, worden een aantal laboratoriumtests uitgevoerd, waaronder PCR voor hepatitis C. Deze test wordt uitgevoerd voor alle mensen in wier bloed de antilichamen tegen HCV zijn aangetroffen.

Wat is PCR-analyse?

Laboratoriumanalyse van PCR voor hepatitis C - een studie van biologisch materiaal om de aanwezigheid van flavavirus te identificeren.

Polymerase-kettingreactie (zoals de afkorting wordt ontcijferd) toont de kwantitatieve waarde van de virale schade van het organisme, de kwalitatieve kenmerken ervan, en ook het genotype van het virus-bevattende RNA.

Op basis hiervan, evenals op basis van aanvullende analyses, worden de methode en duur van de therapie bepaald, evenals de epidemiologische factor (het risico van overdracht op een andere vervoerder).

Wat is RNA-analyse voor hepatitis C?

De hepatitis C-PCR wordt ook RNA-analyse (HCV-RNA) genoemd, omdat deze niet bekend is. Flavavirus bevat een RNA-deeltje met een viriongrootte van 30-60 nm. Een van de kenmerken van dit micro-organisme is een hoge neiging tot mutaties.

Elk van de ondersoorten (genotypes) van het virus heeft verschillende resistentie, wat verschillende behandelingsmethoden en de aard van de verdere prognose voor de patiënt veroorzaakt.

Biologisch materiaal (veneus bloed) wordt behandeld vasten en meestal getest door Real-Time PCR (zeer gevoelige real-time diagnose aan de ondergrens van 15 IU / ml werd bepaald met de geautomatiseerde gesloten systeemmodus).

Er zijn andere tests, bijvoorbeeld COBAS AMPLICOR met een gevoeligheid van 50-100 IU / ml. Voor elk laboratoriumonderzoek is de gevoeligheidsdrempel belangrijk, d.w.z. het vermogen van het reagens om de minimale concentratie van het virus in het biologische materiaal te detecteren.

De referentiewaarde van de test (normale indicatoren) is "niet gevonden".

Typen analyse voor hepatitis C met behulp van de PCR-methode

PCR voor hepatitis C omvat drie belangrijke componenten:

kwalitatieve analyse; kwantitatieve analyse; genotypering.

Deze tests kunnen de aard van viremie bepalen, evenals de genetische tekenen van de ziekteverwekker. Afhankelijk van de gevoeligheid van het diagnosesysteem, wordt de test eenmaal uitgevoerd en soms wordt een tweede test met een gevoeliger reagens uitgevoerd om de resultaten te bevestigen of te verfijnen.

Hoogwaardige hepatitis C-PCR

PCR-analyse voor hepatitis C-kwaliteit is een andere veel voorkomende naam voor de polymerasekettingreactiebepaling. De standaardgevoeligheid van de test, die het mogelijk maakt de aanwezigheid van een virale laesie te detecteren, ligt in het bereik van 10-500 IU / ml.

Negatieve analyse van PCR voor hepatitis C toont aan dat de concentratie van het virus in het bloed van de patiënt lager is dan de drempel van de gevoeligheid van het diagnostische systeem.

Als kwalitatieve PCR een "niet-gedetecteerd" antwoord gaf, dan is het voor de daaropvolgende behandeling belangrijk om de gevoeligheidsdrempel van het reagens te kennen.

Een positieve respons op PCR-analyse voor hepatitis C kan al binnen 4-5 dagen na HCV-infectie worden gegeven.

De eiwitfracties aan flavavirus verschijnen veel later.

Kwantitatieve hepatitis-C-PCR

PCR hepatitis C-kwantitatief is een indicator van een virale belasting die het niveau van concentratie van flavavirus-RNA in het lichaam weerspiegelt. Dit is een indicator die aangeeft hoeveel fragmenten van viraal RNA zich bevinden per kubieke centimeter bloed. De resultaten van het PCR-RNA van hepatitis C in een conventioneel systeem worden uitgedrukt in internationale eenheden per milliliter (IE / ml) en kunnen op verschillende manieren worden geregistreerd, bijvoorbeeld 1,7 miljoen of 1,7 miljoen IE / ml.

Kwantitatieve PCR-diagnose van hepatitis C wordt gegeven aan patiënten vóór het begin van de antivirale therapie en in week 12 van de behandeling om de resultaten van de geselecteerde methode om HCV te bestrijden te evalueren. Virale belasting stelt u in staat om drie belangrijke indicatoren van de ziekte te identificeren:

infectiviteit, d.w.z. de mate van risico van transmissie van het virus van de ene drager naar de andere (hoe hoger de concentratie van flavavirus-RNA, hoe groter de kans op het infecteren van een andere persoon, bijvoorbeeld tijdens seksueel contact); methode en effectiviteit van de behandeling; duur en prognose van antivirale therapie (hoe hoger de virale last, hoe langer de behandeling duurt).

Kwantitatieve PCR-diagnose van hepatitis C hangt af van het type laboratoriumtest en de gevoeligheidsdrempel. De ondergrens van de norm wordt meestal beschouwd als maximaal 600.000 IE / ml, de gemiddelde waarde ligt in het bereik van 600.000-700.000 IU / ml. Resultaten van 800.000 IU / ml en hoger worden beschouwd als hoge niveaus van RNA-bevattend virus.

Belangrijk: er is geen directe relatie tussen het niveau van HCV-RNA in het bloed en de ernst van de ziekte. De patiënt kan een zeer hoge virale last hebben, maar dit geeft nog niet aan dat er een ernstige schade aan de levercellen is.

genotypering

Gezien de hoge mutatieactiviteit van HCV in de natuur, is het belangrijk om in het teststadium te bepalen welk genotype van het virus zich in het bloed van de patiënt bevindt. In totaal zijn 11 genotypen van het hepatitis C-virus op de planeet geregistreerd, waaronder veel ondersoorten. Op het grondgebied van de Russische Federatie zijn 1,2 en 3 gebruikelijk.

PCR-RNA van hepatitis C samen met genotypering is een zeer belangrijk onderdeel van de analyse, omdat stelt de arts in staat om de weerstand (resistentie) van het virus te bepalen, geschikte medicijnen te selecteren en een behandelingskuur voor te schrijven.

Verschillende genotypes van HCV reageren anders op antivirale therapie. Eén genotype vereist bijvoorbeeld tot 48 weken behandeling en de effectiviteit is gemiddeld 60%, terwijl 2 en 3 genotypen tweemaal zo snel worden behandeld, met een werkzaamheid tot 85%.

Genotypering stelt u ook in staat om indirect de conditie van de lever te bepalen. Het 3-genotype van HCV gaat bijvoorbeeld vaak gepaard met steatosis, waarbij vet zich ophoopt in de cellen van het lichaam.

De bloedtest voor PCR in hepatitis C zou een cijfer moeten geven dat het genotype bepaalt. In antwoorden van laboratoria kan worden geschreven "niet getypt" - en dit betekent dat er een virus in het menselijk bloed zit dat niet door het testsysteem wordt bepaald. Dit kan erop duiden dat het genotype niet karakteristiek is voor een bepaald geografisch gebied. In dit geval is het noodzakelijk om de analyse opnieuw te passeren met een hogere gevoeligheid van het diagnosesysteem.

Decodering van PCR-analyse voor hepatitis C

De test voor hepatitis C PCR kan worden gekwantificeerd op basis van de bovenstaande gegevens. Wanneer de resultaten van laboratoriumtests worden ontvangen, worden de volgende gegevens gewoonlijk geschreven:

"Found" / "not found" (hoge kwaliteit PCR voor hepatitis C); de hoeveelheid RNA-bevattende fracties, bijvoorbeeld 831.680 IU / ml (kwantitatieve PCR-bepaling); de figuur die het HCV-genotype bepaalt, bijvoorbeeld - 1, 2, 3, 4; de naam van de test is meestal realtime.

Het belangrijkste bij het ontcijferen van de PCR-analyse voor hepatitis C is het tweede item, dat de virale lading toont die de prognose, de methode en de duur van de behandeling bepaalt.

Belangrijk: als resultaat van de test, naast het cijfer dat het genotype laat zien, kan er een Latijnse letter zijn, bijvoorbeeld 1a, die het subtype van het virus aangeeft. Voor een arts doet het er niet toe: om een ​​behandelingsmethode te selecteren, wordt alleen het genotype genomen.

Als PCR-analyse voor hepatitis C negatief is en ELISA positief - wat betekent dit?

Om laboratoriumtests te ontcijferen, is het belangrijk om contact op te nemen met een hepatoloog of specialist in infectieziekten, die de ontvangen informatie zal uitleggen in overeenstemming met het type diagnostisch systeem en de gevoeligheidsdrempel. In de medische praktijk zijn er veel bloedtestgegevens die een persoon zonder medische voorlichting in verwarring kunnen brengen.

Indien bijvoorbeeld de test voor HCV PCR-negatief en positief ELISA, kan worden aangegeven dat op dit moment in het bloed van de patiënt niet HCV, maar voordat hij een acute vorm van hepatitis C. leed Aangenomen wordt dat de positieve-linked immunosorbent assay (ELISA) blijkt dat in het bloed zijn er antilichamen geproduceerd na de invasie van het virus in het verleden. Maar in de moderne medische praktijk ELISA-analyse is niet voldoende betrouwbaar en geeft vaak ongebruikelijke resultaten, zodat artsen gebruiken het als een primaire screening. Bij het diagnosticeren van de ziekte worden specialisten precies door PCR-tests geleid.

Handige video

In de volgende video is het zeer gedetailleerd en interessant om te vertellen wat de essentie van de PCR-methode is, hoe de analyse is voltooid:

conclusie

Veneus bloed wordt meestal gebruikt voor analyse van hepatitis-C-PCR. Meestal is er een dubbele bemonstering van een biologisch materiaal - voor ELISA en direct voor een PCR-test. Voor de juiste testresultaten is naleving van de belangrijkste regels voor laboratoriumbemonstering van biologisch materiaal vereist:

bloed voor analyse wordt 's morgens op een lege maag toegediend; tussen het eten en het nemen van bloed moet ten minste 8 uur duren; Voordat u de test doet, moet u ook alcohol en gefrituurd voedsel uitsluiten; Gedurende de dag voordat je bloed geeft, moet je een hoge fysieke inspanning vermijden.

De resultaten van bloedonderzoek zijn meestal de volgende dag klaar.

Een speciale laboratoriumstudie - de analyse van hepatitis C ptsr - vereenvoudigt de diagnose van deze virale aandoening aanzienlijk. Een uitzondering is dat niet en hepatitis C. Een klein bloedmonster kan worden gecontroleerd op het gehalte aan RNA en ander genetisch materiaal van het virale agens. De analyse met de PCR wordt uitgevoerd door alle personen met antilichamen tegen hepatitis C die circuleren in het bloedplasma, waarvan de aanwezigheid de kwalitatieve detectie bevestigde.

De interpretatie van de resultaten wordt in de grafiek van de onderzoeksvorm geïnterpreteerd als een "positieve" of "negatieve" analyse. Bovendien is het met behulp van PCR niet alleen mogelijk om op kwalitatieve wijze het minimale gehalte van het virus te bepalen, maar ook om het aantal deeltjes te tellen. Het is dus mogelijk om de geschatte virale lading te bepalen en zo nauwkeurig mogelijk de medische tactiek van de behandeling te bepalen.

Virale schade aan de lever

De lever als een element van het spijsverteringskanaal neemt een enorme last op. In zijn cellen vindt het merendeel van de metabole reacties van alle soorten metabolisme plaats, wat zorgt voor een optimaal functioneren van alle organen en systemen. Tegelijkertijd is de detoxificatiewaarde groot voor het verwijderen van slakken en producten van het metabolisme met fermentatieve gal.

Het verslaan van de lever door virussen van verschillende aard is uiterst gevaarlijk voor het orgel. Een verscheidenheid aan ziektebeelden en niet-naleving van de behandeling van hepatitis leidt tot de eerste plaats in termen van gezondheidsrisico's. Hepatitis C is chronisch en kan langdurig een negatief testresultaat opleveren, waardoor het menselijk lichaam langzaam parasiteert. Het virus wordt overgedragen via biologische vloeistoffen: bloed en minder vaak via sperma. Narcotisch misbruik van niet-steriele spuiten, natuurlijke afgifte van geïnfecteerde vrouwen, letsels door gewonden of delen van gezondheidswerkers kan leiden tot de overdracht van het virus aan gezonde mensen.

Tijdige diagnose van de ziekte wordt belemmerd door een verborgen klinisch beeld en niet-systematische pathologie. Een positief resultaat kan eenvoudig worden gemist door testen van slechte kwaliteit. Alleen een significante laesie van de levercellen veroorzaakt een bepaalde symptomatologie, maar het negatieve effect van viremie tegen die tijd laat geen kans het orgel te herstellen.

De moderne geneeskunde heeft speciale methoden ontwikkeld om het geringste spoor van het virus te herkennen. PCR, ifa, leverbiopsie kan de minste schade aan de lever en het minimale niveau van antilichamen tegen het virus detecteren. De analyse met behulp van PCR is de meest eenvoudige en betrouwbare diagnostische praktijk.

Kwalitatieve analyse

De essentie van de polymerasereactie is de ontwikkeling van een RNA-sequentie. De reactie wordt uitgevoerd wanneer er dezelfde virale eiwitten in het bloedplasma zijn.

Speciale katalysatoren maken het mogelijk om een ​​vergelijkbare virale ketensequentie te synthetiseren, die wordt vergeleken met de bekende nucleotiden van het virale RNA. Op basis hiervan worden virale lading en leverschade bepaald.

De PCR-test onthult meer informatie dan eenvoudigweg het detecteren van een RNA-virus. Het overtreft meerdere malen de standaardmethoden van ifa en andere virale secretie.

PCR is in staat om zelfs een enkele aanwezigheid van het gewenste gen in het afgenomen bloed te detecteren. Deze diagnostische kettingreactie is ook zeer specifiek. De sequentie van nucleotide-ketens is uniek voor elk schepsel, zodat de enzymatische primers identieke sequenties van de gewenste genetische informatie creëren. Elk virus kan dus met de minste nauwkeurigheid worden gedetecteerd, zelfs als de kwantitatieve index extreem klein is.

Patiënten in wier bloed de ontwikkelde antilichamen tegen virale hepatitis werden aangetroffen, verrichten een kwalitatieve studie van ptsr of ifa. Het resultaat van de analyse kan zowel positief als negatief zijn, wat in beide gevallen behandeling vereist.

Ontcijfer de positieve reactie van de kettingreactie volgt als de aanwezigheid van RNA-fragmenten van het hepatitis-virus of als een fenomeen van infectie.

In het bloedplasma vermenigvuldigt het virus op actieve wijze de levercellen en parasiteert het. PCR-diagnostiek kan een negatieve respons geven als de deeltjes van het virale RNA iets in het plasma aanwezig zijn, onder het gevoeligheidsniveau van de test, of helemaal geen niveau. Na een directe infectie groeit de hoeveelheid van het virus relatief langzaam en pas na 1-2 weken kan IFA of ander kwalitatief onderzoek hen onderscheiden.

Negatieve analyse kan worden verkregen in de volgende gevallen:

Bij het nemen van materiaal onder onjuiste omstandigheden, het verkrijgen van een bloedmonster met besmetting; Met eerdere injecties van de patiënt heparine. Wanneer andere enzymen en substraten aanwezig zijn in de genomen monsters, die het verloop van de kettingreactie verstoren.

Kwantitatieve analyse

De kwantitatieve test als microbiologische diagnose is ontworpen om de virale lading te bepalen. Bevestigde kwalitatieve analyse van viremie is de basis voor het bepalen van de hoeveelheid genetisch materiaal en de concentratie ervan. Het aantal gedetecteerde virale RNA's wordt bepaald in een eenheid van bloedvolume, gewoonlijk in 1 milliliter. De benodigde materialen worden uitgedrukt in internationale eenheden, sommige laboratoria in de analyse van ifa gebruiken het aantal exemplaren.

Gewoonlijk wordt vóór elk therapeutisch regime een kwantitatieve analyse van de PCR uitgevoerd. Virale RNA's worden vaak genoeg geteld: na één, vier, twaalf en vierentwintig weken. De 12e week wordt als indicatief beschouwd, omdat op basis van analyse in deze periode het decoderen van de effectiviteit van medische maatregelen wordt uitgevoerd.

Voor elk onderzoek is geen grondig voorbereidend stadium van de patiënten vereist. Het enige dat verboden is voordat bloed wordt ingenomen, is roken.

Kwantitatieve analyse met behulp van PCR of ifa omvat het nemen van monsters uit de ader.

Interpretatie van resultaten als een hoge virale belasting begint bij een bedrag van 800.000 IE / ml. Een dergelijk positief resultaat voor hepatitis C weerspiegelt de aanwezigheid van ten minste 3.000.000 exemplaren in één milliliter bloed. Een laag niveau van viremie stopt bij een waarde van 400.000 IU / ml. De resultaten van de studie kunnen waarden zijn als een negatieve respons, evenals een "onder het meetbereik".

Een kwantitatieve test met een schatting "onder het meetbereik" zegt dat de reactie het RNA niet kon berekenen. Het virus circuleert wel in het lichaam, zoals blijkt uit een positieve kwalitatieve test. Een negatieve indicator van kwantitatieve analyse van ptsr of ifa geeft de afwezigheid van RNA in dit bloedmonster aan.

Met virale lading kunt u de mate van infectiviteit van pathologie en het gevaar van de patiënt voor anderen ontcijferen. Het hoge niveau van viraal RNA dat wordt gedetecteerd tijdens ptsr of ifa, spreekt van het risico van "infectiviteit" van de patiënt.

Ondanks de beperkte overdracht van het virus door het bloed, neemt het risico van overdracht van het virus door de geheimen van de geslachtsklieren, van moeder op kind, toe.

Kwantitatieve analyse biedt belangrijke hulp bij het evalueren van therapeutische interventies. Ifa en ptsr weerspiegelen het effect van antivirale geneesmiddelen, helpen de timing van de therapie vast te stellen en beoordelen de vorming van immuniteit bij patiënten. Een vroege negatieve respons van laboratoriumtesten duidt op een succesvolle behandeling en de noodzaak om de behandelingsduur te verkorten. De langzame afname van de viraliteitscijfers kan worden ontcijferd als de noodzaak om het therapeutische verloop te wijzigen. Het niveau van de virale lading bepaalt de prognose van de ziekte. Hepatitis met een lage snelheid wordt waarschijnlijk eenvoudigweg behandeld en kan het virus volledig uit het lichaam verwijderen. Hoge percentages virale aanwezigheid in het bloed vereisen een attente behandeling en een veelzijdige behandeling.

Hepatitis C is een inflammatoire pathologie waarbij de levercellen worden aangetast. De ziekte ontstaat door de penetratie van het hepatitis C-virus (HVC) in het menselijk lichaam.

De vorm van de ziekte kan acuut of chronisch zijn.

Meestal symptomen van acute vormen van de ziekte, de meeste patiënten niet beschikbaar zijn, soms de ziekte gaat gepaard met pijn in de buik, verminderde prestaties, toegenomen vermoeidheid, eetstoornissen, donkere schaduw van urine, verkleuring van ontlasting, gele kleur van de huid en slijmvliezen, gewrichtspijn. Er zijn 6 tot 8 weken na infectie symptomen zoals regel, maar deze kunnen zich na zes maanden manifesteren.

Met de ontwikkeling van dergelijke verschijnselen is het noodzakelijk om een ​​aanvraag voor een medische instelling in te dienen en een uitgebreid onderzoek van het hele organisme te ondergaan. Als onderdeel van een medisch onderzoek wordt een bloedtest voor hepatitis C uitgevoerd.

Tegenwoordig is het, met behulp van moderne diagnostische technieken, mogelijk om deze pathologie in het beginstadium van ontwikkeling te identificeren, wat de kansen op een volledige genezing van de ziekte aanzienlijk vergroot.

Analyse van hepatitis C is verplicht voor de volgende groepen mensen:

vrouwen in de periode van het dragen van een kind; personen met tekenen van hepatitis; werknemers van medische instellingen; potentiële donoren van organen en bloed; drugsverslaafden, met hiv besmette personen, personen die een ongeordend, intiem leven leiden.

Lijst met noodzakelijke onderzoeken

Welke tests moet ik nemen met hepatitis C? Om een ​​ziekte nauwkeurig te diagnosticeren, de oorzaken vast te stellen en de conditie van het leverparenchym te bepalen, is het noodzakelijk om de volgende onderzoeken uit te voeren:

algemene analyse van urine en bloed; biochemische bloedanalyse; PCR-analyse; bloedtest voor de detectie van antilichamen tegen HVC; een bloedtest voor beschikbare antilichamen tegen zijn eigen hepatische cellen; een leverbiopsie.

De interpretatie van de bloedtest voor hepatitis C wordt uitgevoerd door een specialist. Laten we elke onderzoeksmethode in meer detail bekijken, en we zullen ook begrijpen wat voor soort analyse voor hepatitis C het meest accuraat is.

Algemene analyse

Bij het uitvoeren van een algemene bloedtest op hepatitis C, kunt u de toestand van de patiënt beoordelen. Veranderingen in bloedtellingen worden niet gezien als specifieke symptomen van hepatitis, maar met deze ziekte zijn er schendingen zoals:

de concentratie van hemoglobine, bloedplaatjes en leukocyten neemt af; het gehalte aan lymfocyten neemt toe; bloedcoagulatie is verstoord; de snelheid van erythrocytsedimentatie (ESR) neemt toe.

De algemene analyse van urine maakt het mogelijk om in zijn samenstelling urobeline te detecteren - een galpigment dat in de urine verschijnt als gevolg van een defect van de lever.

Biochemische analyse

Biochemische analyse van bloed bij hepatitis C stelt ons in staat om dergelijke schendingen te identificeren als:

verhoogde leverenzymen (alanine transaminase - ALT en AST - AST) die het bloed voeren wanneer beschadigde hepatocyten. In de normale toestand zouden deze indicatoren bij mannen niet hoger mogen zijn dan 37 IE / l, bij vrouwen - niet hoger dan 31 IE / l. Verhoogde concentratie van ALT en AST bij hepatitis C, asymptomatische, vaak het enige symptoom van de ziekte. Bovendien verhoogt de bloedspiegel glutamyl alkalische fosfatase (gewoonlijk niet meer dan 150 IU / l). het gehalte aan bilirubine (zowel totaal als direct) in het bloed wordt overschreden. Als het niveau van het gele pigment in het serum hoger zijn dan 27-34 umol / L, geelzucht optreden (tot 80 mol / l op een eenvoudige wijze, 86-169 pmol / L - matig boven 170 mmol / l - ernstige vorm). Verminderde het niveau van albuminen, de concentratie van gamma-globulines, in tegendeel, toegenomen. Gamma-globulines bestaan ​​uit immunoglobulines - antilichamen, die het lichaam beschermen tegen ziekteverwekkers. verhoogde concentratie van triglyceriden in het bloed.

PCR-onderzoek

Met behulp van de PCR-techniek is het mogelijk om een ​​pathogeen te diagnosticeren. Het uitvoeren van deze analyse maakt het mogelijk om een ​​virus in het bloed te detecteren, zelfs als de hoeveelheid ervan minimaal is. PCR analyse van hepatitis C toelaat de bestaande infectie reeds bepaald na 5 dagen na infectie, dat wil zeggen, lang voordat de antilichamen verschijnen.

Als het resultaat van een bloedtest op hepatitis C met de PCR-methode positief is, duidt dit op de aanwezigheid van een actieve infectie in het lichaam. Met behulp van deze methode kan een kwalitatieve en kwantitatieve studie van HVC RNA worden uitgevoerd.

In de loop van de kwalitatieve analyse van PCR voor hepatitis C is het mogelijk om een ​​bestaand virus in het menselijk lichaam te detecteren.

Een dergelijke diagnostische procedure wordt uitgevoerd als een anti-HVC in het bloed wordt gedetecteerd.

De transcriptie van de analyse voor hepatitis C bevat informatie dat de infectie in het lichaam wordt gedetecteerd of niet wordt gedetecteerd. In de normale toestand worden pathologische stoffen in het bloed niet gedetecteerd.

Als de analyse voor hepatitis C een positief resultaat geeft, geeft dit aan dat het pathogene micro-organisme continu verdeeld is en de hepatische cellen beïnvloedt.

De resultaten van een dergelijke analyse kunnen onbetrouwbaar zijn, het is mogelijk in de volgende gevallen:

verontreiniging van het gebruikte biomateriaal; als er heparine in het bloed zit; in de aanwezigheid van chemische of proteïnestoffen (remmers) in het biomateriaal dat wordt onderzocht, en die de elementen van PCR beïnvloeden.

De kwantitatieve analyse van hepatitis C geeft informatie over de hoeveelheid van het virus in het bloed, dat wil zeggen, het bepaalt de virale last. Deze term betekent de hoeveelheid HVC-RNA die in het bloed aanwezig is (bijv. 1 ml). In de interpretatie van de kwantitatieve analyse voor hepatitis C wordt deze waarde uitgedrukt in een digitaal equivalent, gemeten in IE / ml.

Bloed voor PCR in hepatitis C wordt vóór de therapeutische maatregelen genomen. Nadat de analyse is uitgevoerd na 1, 4, 12 en 24 weken. De studie in week 12 is indicatief en wordt uitgevoerd om de effectiviteit van lopende behandelingsprocedures te beoordelen.

Als de analyse van hepatitis C tijdens de zwangerschap positief is en de virale last wordt overschreden, is het risico van overdracht van ziekteverwekkers van de zieke moeder op het kind meerdere malen toegenomen. Ook is, met verhoogde virale belastingswaarden, de implementatie van therapeutische maatregelen moeilijk.

Volgens de analyse van hepatitis C is de virusbelasting hoger dan 800 000 IE / ml als deze hoger is. Als de cijfers lager zijn dan 400.000 IE / ml, wordt het niveau van virale lading als laag beschouwd.

De analyse van hepatitis C met behulp van de PCR-methode wordt als de meest accurate beschouwd en heeft verschillende voordelen ten opzichte van andere onderzoeksopties, namelijk:

directe diagnose van de ziekteverwekker. Bij het uitvoeren van traditionele studies, wordt de aanwezigheid van eiwitmarkers, die de producten zijn van de vitale activiteit van pathogene stoffen, bepaald. Er staat alleen dat de infectie in het bloed aanwezig is. Wanneer de analyse voor hepatitis C wordt uitgevoerd met behulp van de PCR-methode, is het mogelijk om het type veroorzaker van een gevaarlijke pathologie te bepalen. specificiteit van de methodologie. Tijdens deze procedure wordt een uniek DNA-gebied geïdentificeerd in het biomateriaal dat overeenkomt met slechts één type pathogeen. Dit maakt het mogelijk om de kans op het verkrijgen van onbetrouwbare resultaten te minimaliseren. hoge gevoeligheid. Bij het uitvoeren van PCR-analyse kan een minimale hoeveelheid van het virus worden gedetecteerd. Dit is belangrijk als conditioneel pathogene stoffen worden geïdentificeerd die alleen een bedreiging vormen als hun niveau wordt verhoogd. bij gebruik van deze techniek kunnen verschillende pathogenen in één biomateriaalmonster worden gedetecteerd. het is mogelijk om verborgen infecties te detecteren. Bovendien kunt u met de analyse ziekteverwekkers diagnosticeren die in cellen leven en een hoge antigene variabiliteit hebben.

Als de resultaten van de studie positief zijn, worden de sporen van het virus gevonden in het biomateriaal, waarna het netwerk in het lichaam een ​​infectie heeft.

Negatieve analyse van PCR voor hepatitis C betekent dat er geen sporen van infectie in het biomateriaal zijn.

Immunologisch onderzoek

Met deze methode kunt u antilichamen tegen alle typen van het hepatitis-virus identificeren, evenals antilichamen tegen de hepatische cellen in uw lichaam, die worden bevorderd door de ontwikkeling van auto-immune hepatitis.

De resultaten die tijdens het onderzoek zijn verkregen, zijn 3 maanden relevant, daarna moet u opnieuw bloed doneren voor hepatitis C.

Het is ook mogelijk om express onderzoek uit te voeren met behulp van speciale teststrips. Deze analyse maakt het mogelijk de antilichamen tegen het virus in het bloed en speeksel te bepalen, een dergelijke procedure kan onafhankelijk thuis worden uitgevoerd.

Lever biopsie

Om een ​​dergelijke analyse uit te voeren, wordt een element van het leverparenchym genomen en wordt een histologisch onderzoek van het resulterende biomateriaal uitgevoerd. Dit stelt ons in staat om de conditie van het orgaan te beoordelen: om inflammatoire, necrotische foci, het stadium van fibrose en dergelijke te identificeren.

Tegenwoordig worden tests gebruikt die de histologische analyse van het leverparenchym vervangen.

Gebruik de specifieke biomerkers van veneus bloed om het stadium van leverschade en de intensiteit van het ontstekingsproces te beoordelen. Met behulp van Fibrotest is het mogelijk om de mate van fibreuze weefselproliferatie vast te stellen.

Bij het uitvoeren van Actitest kan informatie worden verkregen over de intensiteit van pathologische processen in het leverparenchym. Gebruik van Steatotest kan de vette degeneratie van leverweefsel diagnosticeren en de mate van dit proces beoordelen. Fibromax bestaat uit alle bovenstaande tests en kan enkele andere onderzoeken omvatten.

Voorbereiding op de studie

Welke tests worden uitgevoerd voor hepatitis C en hoe dit of dat type onderzoek wordt uitgevoerd, kwamen we te weten. Het is even belangrijk om te weten hoe je je moet voorbereiden op de analyse.

Voor het verkrijgen van betrouwbare resultaten wordt aanbevolen om te voldoen aan de volgende vereisten:

Analyses van hepatitis C moeten 's morgens op een lege maag worden ingenomen. De laatste keer dat u voedsel zou moeten eten, minstens 8 uur vóór de test. Biomateriaalbemonstering kan overdag of 's avonds worden uitgevoerd. In zo'n geval is het belangrijk dat er niet minder dan 5-6 uur verstrijken tussen de laatste maaltijd en de analyse. Voordat bloed wordt gedoneerd voor hepatitis C, moeten thee, koffie, sap of andere dranken worden weggegooid, alleen water is toegestaan. 48 uur vóór het onderzoek is het noodzakelijk om de consumptie van vet, gefrituurd voedsel en alcoholhoudende dranken uit te sluiten. Gedurende minstens een uur voordat u de test uitvoert, moet u afzien van roken. Voer de analyse niet onmiddellijk uit na de echografie, instrumenteel, radiologisch onderzoek, een massagesessie of fysiotherapie. een dag voor het onderzoek is vereist om het gebruik van medicatie en intense lichamelijke activiteit uit te sluiten. Emotionele stress is ook gecontra-indiceerd. 15 minuten voordat de test wordt aanbevolen om deze in een stille staat te houden.

Bloedbemonsteringsprocedure

Waar kan ik de test voor hepatitis C doorstaan? De verzameling biomateriaal voor verder onderzoek wordt uitgevoerd in het laboratorium van de medische instelling of bij de patiënt thuis.

Bloed uit de ader wordt als volgt genomen:

Met behulp van een speciale bundel rond de onderarm van de patiënt wordt de veneuze bloedstroom opgeheven. Dankzij dergelijke manipulaties worden de aderen gevuld met bloed en zullen ze meer opvallen, wat het inbrengen van de naald aanzienlijk zal vergemakkelijken. Het gedeelte van de huid waar de naald wordt ingebracht, wordt zorgvuldig behandeld met alcohol of alcoholbevattende vloeistof. De naald wordt voorzichtig in de ader ingebracht, waarna een reageerbuis wordt aangebracht die speciaal is ontworpen voor het verzamelen van bloed. onmiddellijk nadat de naald in de ader is ingebracht, wordt de knel-tourniquet uit de hand van de patiënt verwijderd. nadat het nodige volume bloed is verzameld voor de analyse, wordt de naald geleidelijk uit de ader verwijderd. een steriel wattenstaafje of gaasje gedrenkt in alcohol moet op de injectieplaats worden aangebracht. om het begin van een hematoom te voorkomen, moet de tampon met enige moeite worden gedrukt tot aan het gebied waar de naald wordt ingebracht, buig de arm naar het ellebooggewricht en houd deze een aantal minuten vast. Dergelijke acties helpen ook om het bloed snel te stoppen.

Gezien een goede techniek van intern beheer, is deze procedure absoluut veilig en lezen veroorzaakt geen pijnlijke sensaties.

In zeldzame gevallen, na bloedafname, is zwelling van de aderen mogelijk. Dit fenomeen wordt "flebitis" genoemd. Het probleem zal worden verlicht door comprimeren (niet heet), het moet meerdere keren per dag op opgezwollen huidgebieden worden toegepast.

Er kunnen ook bepaalde problemen zijn als er een bloedingsaandoening is. Het gebruik van aspirine, warfarine en andere bloedverdunnende medicijnen kan bloedingen veroorzaken. Daarom moet u, voordat u de analyse uitvoert, weigeren om medicijnen in te nemen. Als de behandeling niet kan worden geannuleerd, moet u de specialist hierover informeren.

Voorwaarden en prijzen

Hoeveel analyse wordt er uitgevoerd voor hepatitis C? De resultaten van een bloedtest op hepatitis kunnen binnen enkele uren en over een paar dagen (meestal niet meer dan 8 dagen) klaar zijn. De duur van de voorbereiding van de resultaten hangt af van het type virus en de gekozen analysetechniek. Het onderzoek uitgevoerd met de PCR-methode is sneller. De resultaten in dit geval zijn binnen enkele uren gereed.

Hoeveel is een analyse voor hepatitis C? Afhankelijk van de kliniek en de complexiteit van de studie, kan de prijs van de procedure variëren van 400 tot 11.000 roebel.

Opgemerkt moet worden dat het enkele weken kan duren om een ​​voldoende hoeveelheid antilichamen tegen HVC te vormen. Daarom kan in een vroeg stadium van de ontwikkeling van de pathologie het resultaat van de studie vals-negatief zijn.

Bovendien is het verkrijgen van onnauwkeurige gegevens mogelijk als de analyse slecht wordt uitgevoerd en de transportvoorwaarden voor het ontvangen biomateriaal worden geschonden (de monsters moeten maximaal 2 uur na de bloedafname aan het laboratorium worden afgeleverd).

Als het resultaat van de studie positief is, moet u onmiddellijk een arts met een besmettelijke ziekte raadplegen. De specialist voert een aanvullend onderzoek uit en schrijft de juiste behandeling voor.

Denk je dat het onmogelijk is om hepatitis C te genezen?

Vandaag zal modern drugs en de nieuwe generatie sofosbuvir Daklatasvir met 97-100% waarschijnlijk voor altijd genezen van hepatitis C. De nieuwste medicatie is beschikbaar in het Russisch bij de officiële vertegenwoordiger van de Indiase farmgiganta Zydus Heptiza. De bestelde producten worden binnen 4 dagen geleverd door de koerier, betaling na ontvangst. Ontvang gratis advies over het gebruik van moderne middelen, evenals informatie over hoe u de officiële website van Zydus leverancier kunt kopen in Rusland.


Gerelateerde Artikelen Hepatitis